环境水体中肠道病原菌的定量PCR检测及病原污染特性研究-市政工程专业论文.docxVIP

声明 本人郑重声明我所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及 取得的研究成果。尽我所知，除 γ 文中特别加以标 注和致谢的地方外，论文中 不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果 ，也不包含本人或其他人在其它单 位已申请学位或为其它用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做 的所有贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了致谢。 申请学位论文与资料若有不实之处 ，本人承担一切相关责任。 论文作者签名: 3条1t 日期:}_IJ f) . I ? {f 关于论文使用授权的说明 本人完全了解西安建筑科技大学有关保留 、使用学位论文的规定，即:学 校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的 全部或部分内容 ，可以采用影印、缩印或者其它复制手段保存论文。 (保密的论文在论文解密后应遵守此规定) 时础:以尖刊协川竹日 注:请将此页附在论文首页。 曲iJ支建筑科技大学硕士学位论文 环境水体中肠道病原菌的定 量 PCR 检测及病原污染特性分析 专 业: 市政工程 研究生: 吕英俊 导 师: 刘永军副教授 摘 要 本研究以西安市水源水(黑河)、景观水体(北湖、兴庆湖)、纳污水体(沪河)以 及污水厂二级出水(北石桥污水处理厂)为研究对象，采用肠道病原细茵通用号|物， 利用定量 PCR 方法对不同地表水体中病原细菌进行连续 5 个月的检测 (2007.3-2007.7)，同时采用膜过滤方法分析了水体中的细菌总数、总大肠菌群和 粪大肠菌群在不同水体中的存在情况和分布规律。 通过研究建立了用定量聚合酶链式反应技术 (QPCR)快速检测地表水中病原 细菌的方法，该方法能同时检测到包含沙门民菌、志贺氏菌、霍乱弧菌、大肠埃 希氏菌四种病原菌的一大类病原微生物，该方法不但快速灵敏而且可以将 DNA 提 取、扩增、定量分析控制在 5 小时内完成，为地表水病原微生物的快速检测及病 原污染风险评价奠定基础 。 对 QPCR 检测结果与滤膜法测得的三种细菌群 CFU Ccolony fonning units )值 进行比较分析。 5 个水体 (N=55) 检测结果表明，细菌总数检测结果是 QPCR 的 7-.. 9 倍 。病原细菌的几何平均值范围 ， MF 法细菌总数菌群为l.l xl04 9.8xl01 CFU/ I OOmL 之 间， QPCR 法在1.2x 103 1.3x 101CCElIOOmL之间。结果显示定量 PCR 检测结果与传统方法检测结果表现出一定的相关性，与细菌总数表现为 0.86 的高相关，而与大肠菌群 和粪大肠菌群的相关性都超过 0.5以上 。 根据地表水质微生物评价标准，结合粪大肠菌群检测结果及 QPCR 检测结果， 对五处水体进行微生物污染评 价 。黑河水完全符合国家水源水质要求，属于第 I 类地表水，定量 PCR 结果满足Jll类水质标准水源水要求;北湖和兴庆湖粪大肠菌 群数分别可达到第 I 和 11类地表水标准;沪河水体，据粪大肠菌标准超出第 V 类 标准 ，同时 QPCR 值较高，受病原菌污染风险较 大:北石桥二级出水粪大肠菌群 数超出第 V 类标准， QPCR 值也显示出较高的 病原菌污染风险。如 果要用 QPCR 方法对地表水体的病原菌污染进行健康风险评价，还需要进行长期深入的研究。 关键词:地表水、病原菌、定量 PCR、污染特性分析、·膜过滤 论文类型: 基础应用 也安建筑科技大学硕士学位论文 Detection of enteric bacteria from su?ace waters by QPCR and analysis of patbogenic bacteria pollution characteristic Speciality : Municipal Engineering Autbor: Lv Yingjun Advisor: Associate Prof. Liu Yongjun ABSTRACT To study Ihe palhogenic pollut ion characteristic ofthe surface waler，we chose five waler body including a source water for drink ing waler supply (Heihe 阳v叫， two landscape lake (Beihu Lake and Xingqing Lake)，a water source receiving industrial discharge (Chanhe River) and a second缸y effluent (Beishiqiao Was