课件：非法酵菌鉴定.ppt

如何检测? 产KPC酶的菌株用常规药敏试验不容易检出。 CLSI关于碳青霉烯类的判断标准： 厄他培南≤2μg/ml 亚胺培南、美罗培南≤4μg/ml 因此，MIC2μg/ml 或4μg/ml的菌株仍可判断为敏感的 警惕：在常规药敏中如遇第三、第四代头孢菌素以及其他的β-内酰胺类耐药的菌株均应该进行稀释法测定碳青霉烯类的对这些菌株的MIC。 检测KPC酶的最佳底物 厄他培南是检测KPC酶的最佳底物。 建议1：可将该药列为常规药敏试验的品种 建议2：对所有具有ESBLs/AmpC酶样表型（即对第三、第四代头孢菌素耐药）的肠杆菌科细菌采用纸片法或MIC法（E-试验）进行厄他培南（和其他碳青霉烯类）的测定。 如MIC为2或4μg/ml应视作有产KPC酶和其他碳青酶霉烯酶的可能。 这时应与临床医师联系，并将该菌株送往参考试验室作进一步的研究。 改良的Hodge 试验 0.5麦氏浊度单位大肠埃希菌 ATCC25922涂布MH平板 中间贴亚胺培南（10μg）纸片 接种待检菌的无菌接种环自 纸片外缘向平板边缘划线 35℃过夜培养 结果判断：亚胺培南抑菌圈内出现 待检菌矢状生长者为产碳青霉烯酶 菌株 PCR 扩增试验、DNA测序证实为某种KPC酶 E coli ATCC25922 KPC+？ KPC - KPC+？ 不动杆菌的耐药机制 对多种窄谱?－内酰胺酶耐药由于TEM－1和CARB型?－内酰胺酶 对新型三代头孢菌素耐药是因为产大量染色体头孢菌素酶和超广谱的TEM酶 不动杆中最主要的碳青霉烯酶是D类酶 OXA-23、24、25、26、27、40、49、51、 54、55、58、60 该酶能水解亚胺培南、青霉素，但不水解三代头孢菌素. 不动杆菌主要耐药机制 不动杆菌中还产IMP或VIM型金属酶，该酶水解底物范围广，包括碳青霉烯类、青霉素类和头孢菌素抗生素，不被克拉维酸等酶抑制剂抑制，但能被EDTA、2-巯基丙酸抑制 嗜麦芽窄食单胞菌 常感染严重衰弱和免疫力低下病人 在医院水龙头、污水排水孔呼吸机湿化器均可分离到 可引起菌血症、心内膜炎、医院获得性肺炎、尿路感染、皮肤、软组织 静脉放置插管是引起菌血症的主要原因，死亡率达41～69％ 嗜麦芽窄食单胞菌的耐药机制 细胞壁对抗生素的亲和力极差 膜蛋白对氨基糖甙渗透力低下 药泵外排机制 产二种??－内酰胺酶 L1 ?－内酰胺酶 L2??－内酰胺酶 （金属酶） （头孢菌素酶） 细菌定植的定义 定植是个”相对”的概念 定植 感染 宿主因素 细菌本身因素 下呼吸道感染中,非发酵菌是临床棘手的问题 下呼吸道中,非发酵菌易定植 内源性:细菌抵抗力强---- 医源性 抗生素选择压力 一旦演化为感染,病情重,死亡率高 MIC/药敏结果与临床治疗有矛盾 分离株不一定是感染病原菌 预防比治疗更重要 在治疗每一患者前用含酒精的洗手液洗手; 清洁可能污染的物体表面; 特别注意机械通气接口的消毒。 短波单胞菌属生物学特性 短波单胞菌属 氧化酶阳性 不分解糖 醇或反应很弱 短波 紧密螺旋单极鞭毛 生长缓慢 48h 可见菌落 深黄到橘黄色素 七液苷阳性 区别于其他产碱假单胞菌 临床少见 体弱 免疫力低下患者感染 菌血症 rRNA V 寡养单胞菌属或窄食单胞菌属 嗜麦芽寡氧单胞菌 嗜麦芽寡养单胞菌名称变化 寡养单胞菌属生物学特性 1961年嗜麦芽假单胞菌 1983年嗜麦芽黄单胞菌 1993年嗜麦芽寡养（窄食）单胞菌 寡养(窄食)单胞菌属 寡养单胞菌属生物学特性 无溶血 呈淡绿色或浅绿色 有氨水味 血平板菌落粗糙 菌落特点 氧化酶阴性 葡萄糖氧化缓慢 麦芽糖快速氧化 赖氨酸 DNA 阳性 寡养单胞菌属生物学特性 生化反应 耐药特点 寡养单胞菌属生物学特性 天然耐药 泰能 SXT 敏感 氨基糖甙类 不定菌属的非发酵菌 金色单胞菌属 黄色单胞菌属 （浅黄假单胞菌） 浅金黄单胞菌 栖稻黄色单胞菌 （栖稻黄色假单胞菌） 不定菌属的非发酵细菌 鞘氨醇 希瓦菌属 希瓦 16个种 深海 羽田 少动鞘氨醇菌 有意义 单胞菌属 鞘氨醇单胞菌: 16个 少动鞘氨醇有意义 希瓦菌: 希瓦 深海 非发酵菌的分类 第二组 有动力 周鞭毛 土壤杆菌属 医学上唯一有意义的菌属 根瘤菌科 产碱杆菌科 产碱杆菌属 鲍特菌属 非发酵菌的分类 条件致病菌 院内感染 产碱杆菌属 木糖氧化产碱杆菌 木糖氧化亚种 脱硝亚种