实验方法学.PDFVIP

· · 　 Ｃｈｉｎｅｓｅ ＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　 ２０１８ Ａｕｇ ３４ ８ １１７５～８ １１７５ 中国药理学通报 ；（）： 网络出版时间：２０１８－７－２ １３：５４　 网络出版地址：ｈｔｔｐ：／ ／ ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ ｋｃｍｓ／ ｄｅｔａｉｌ／ ３４．１０８６．Ｒ０９５５．０５４．ｈｔｍｌ 实验方法学 ◇ ◇ 基于实时荧光定量监测逆转录病毒 ＭｕＬＶ／ Ｆｒｉｅｎｄ 感染方法的建立与评价 １，２ ２ ２ １ ２ 宋姝庭，孙　 丽，蒋金凤，黄　 海，王建华 （１． 上海大学生命科学学院，上海　 ２００４４４；２． 中国科学院上海巴斯德研究所，上海　 ２０００３１） ： 后，可促使体内的红系祖细胞在没有红细胞生 ｄｏｉ １０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１８．０８．０２７ ＭｕＬＶ／ Ｆｒｉｅｎｄ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－１９７８（２０１８）０８－１１７５－０４ 成素（ ， ）的情况下，仍分化为红细胞，并定 ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ ＥＰＯ ４－６ 中国图书分类号： ； ； ； ； ； ［ ］ Ｒ３３２ Ｒ３６３３３２ Ｒ３７３９ Ｒ３４２２ Ｒ４４６９ 位在脾脏中，导致脾脏肿大，最终小鼠因脾破裂死亡 。 ； Ｒ５１２９ Ｒ７３３７ 　 　 ＭｕＬＶ／ Ｆｒｉｅｎｄ感染小鼠模型的建立，在研究逆转录病毒 摘要：目的　 建立基于实时荧光定量ＰＣＲ 的病毒复制检测 致病机制、抗病毒策略评价，以及肿瘤的发生中具有重要的 方法，监测ＭｕＬＶ／ Ｆｒｉｅｎｄ急性感染小鼠病毒复制动力学。方 意义。ＭｕＬＶ／ Ｆｒｉｅｎｄ感染急性阶段，血液中病毒载量快速上 法提取 病毒基因组 ，逆转录为 ， 　 ＭｕＬＶ／ Ｆｒｉｅｎｄ ＲＮＡ ｃＤＮＡ 升，引发机体免疫反应以抑制病毒复制，随后，感染进入慢性 ７ 扩增病毒ｇａｇ片段，连接入ＰＭＤ１９Ｔ载体，构建标准品，并合 ［］ 阶段，在此过程中，病毒整合到宿主基因组中。由于 成特异性荧光探针，建立病毒复制定量的标准曲线；ＢＡＬＢ／ ｃ ＭｕＬＶ／ Ｆｒｉｅｎｄ与人类免疫缺陷病毒Ｉ 型（ｈｕｍａｎ ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉ 小鼠腹腔接种 病毒，在急性感染不同时期，实 ＭｕＬＶ／ Ｆｒｉｅｎｄ ｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓｔｙｐｅ １，ＨＩＶ１）病毒复制特性及急性临床症状相 时监测小鼠组织内病毒复制动力学。结果　 成功构建基于 似，ＭｕＬＶ／ Ｆｒｉ