规范《GB15193.3-94-急性毒性试验》.pdfVIP

中华人 民共和 国国家标准 GB 15193.3一94 急 性 毒 性 试 验 Acutetoxicitytest ， 主胭内容与适用范围 本标准规定了急性毒性试验的基本技术要求。 本标准适用于测定环境有害物质的急性毒性作用。 2 原理 经口一次量给予或24h内多次给予受试物后，在短时间内动物所产生的毒性反应，包括致死的和 非致死的指标参数，致死剂量通常用半数致死剂量LDs。来表示。 3 半数致死里(LD5o)的定义 半数致死量(LD动是使一组受试动物死亡50%的剂量，其单位是每公斤体重所摄入受试物质的毫 克数，即mg/kg体重。 4 实验步骤 41 动物 一般均分别用两种性别的成年小鼠和大鼠。小鼠体重为1822g，大鼠体重为180-J220g。如对受 试物的毒性已有所了解，还应选择对其敏感的动物进行试验，如对黄曲霉素选择雏鸭，对氰化物选择鸟 类。 4.2 给予受试物的途径 经 口。 4.2.1动物应隔夜空腹(一般禁食16h左右，不限制饮水)。 4.2.2 一般采用水或食用植物油，可考虑用梭甲基纤维素、明胶、淀粉作为混悬液;不能作成混悬液时， 可作其他型式的制备(如糊状物等)。必要时可采用二甲基亚枫。但不能采用具有明显毒性的有机化学 溶剂。如采用未知毒性的溶剂应单设对照组观察。 4.2.3给予受试物的体积，小鼠为。.4mL/20g体重，大鼠为2.0mL/200g体重。 4.2.4 一般一次性给予受试物，如估计受试物的毒性很低或溶解度很低者，可一日内多次给予。每次间 隔2-3h，仍合并作为一次剂量计算。但只须剂量达到10g/kg体重仍不引起动物死亡，即可停止再进 行更多次的给予 4.3 方法 可任选下列方法之一: 4.3.1 霍恩氏(Horn)法 4.3.1.1预试验:可根据受试物的性质和已知资料，选用下述方法:一般多采用10,100和1000mg/kg 的剂量，各以2-3只动物预试。根据24h内死亡情况，估计LDso的可能范围，确定正式试验的剂量组。 一 一 一 一 一 中华人民共和国卫生部1994一08-10批准 1994一08门0实施 GB 15193.3一94 也可简单地采用一个剂量，如215mg/kg,用5只动物预试。观察2h内动物的中毒表现。如症状严重. 估计多数动物可能死亡，即可采用低于215mg/kg的剂量系列 反之症状较轻，则可采用高于此剂量的 剂量系列。如有相应的文献资料时可不进行预试 43.1.2 动物一般每组用5只大几小鼠。 4.3，3 常用的剂量系列为: 1“} :6145}Xt0一‘。’士’士‘2’士3 Xt`0t=0，士1，士2,土3为小，所以结果较为精确。一般试验时，可根据上述 因为剂量、距较31..106 剂量系列设计5个组，即较原来的方法在最低剂量组以下或最高剂量组以上各增设一组，这样在查表时 容易得出结果。 4.3.1.4 正式试验:将动物在实验动物房饲养观察1-2d，使其适应环境，证明其确系健康动物后，进 行随机分组。给予受试物后一般观察9或14d，若给予4d后继续有死亡时，需观察14d，必要时延长到 28d。记录死亡数，查表求得LDso，并记录死亡时间及中毒症状等。 4.3.1.5此法优点是简单易行，节省动物;缺点是所得LD,。的可信限范围较大，不够精确。但经多年来 的实际应用与验证，同一受试物与寇氏法所得结果极为相近。因此对其测定的结果应认为是可信与有效 的。 4.3.2 寇氏(Korhor)法 4.3.2.1预试验:除另有要求外，一般应在预试中求得动物全死亡或90%以上死亡的剂量和动物不死 亡或10%以下死亡的剂量，分别作为正式试验的最高与最低剂量。 4.3.2.2 动物:除另有要求外，一般以设5-10个剂量组，每组6-10只动物为宜 4.12.3 剂量:将由预试验得出的最高、最低剂量均换算为常用对数