课件：细菌学检验.ppt

* * 沉淀生长 混浊生长 表面生长 * * 固体培养基中 菌落（S型） 菌苔 菌落（R型） * * 混浊生长 沿穿刺线生长生长 有鞭毛 细菌 无鞭毛 细菌 * * （一）碳水化合物的代谢试验 1. 糖（醇、苷）类发酵试验 是鉴定细菌最主要和最基本的试验，特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要 生化反应 * * 氧化型 发酵型 产碱型 主要用于肠杆菌科细菌与非发酵菌的鉴别，前者均为发酵型，而后者通常为氧化型或产碱型。也可用于葡萄球菌与微球菌间的鉴别。 * * 迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。本试验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。 * * 4．七叶苷水解试验 主要用于D群链球菌与其他链球菌的鉴别。 5．甲基红试验 主要用于鉴别大肠埃希菌与产气肠杆菌。 6．V―P试验 本试验常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性的 细菌，后者通常为阴性。 * * 吲哚(靛基质)试验：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。 明胶液化试验：主要用于肠杆菌科细菌的鉴别。 硫化氢试验 培养基：PbAc或FeSO4 培养基 应用：主要用于肠杆菌科中属及种鉴别 * * 4．尿素分解试验 主要用于肠杆菌科中变形杆菌属细菌的鉴定。 5．苯丙氨酸脱氨酶试验 主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。变形杆菌属、普罗菲登斯菌属和摩根菌属细菌均为阳性，肠杆菌科中其他细菌均为阴性。 6．氨基酸脱羧酶试验 主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。 * * 1．枸橼酸盐利用试验 用于肠杆菌科中菌属间的鉴定。 2．丙二酸盐利用试验 肠杆菌科中属间及种的鉴别。 * * 1．氧化酶试验主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别。 2．过氧化氢酶试验（触酶试验）用于革兰阳性球菌的初步分群。 * * 本试验在细菌鉴定中广泛应用。肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐；铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌等假单胞菌可产生氮气；有些厌氧菌如韦荣球菌等试验也为阳性。 * * 4．脂酶试验 主要用于厌氧菌的鉴别。 5．卵磷脂酶试验 主要用于厌氧菌的鉴定。 6． DNA酶试验 在革兰阳性球菌中只有金黄色葡萄球菌产生DNA酶，在肠杆菌科中沙雷氏菌和变形杆菌产生此酶。 * * 8 ． CAMP试验 在链球菌中，只有B群链球菌CAMP试验阳性，故可作为特异性鉴定。 7 ．凝固酶试验作为鉴定葡萄球菌致病性的重要指标，也是葡萄球菌鉴别时常用的一个试验。 * * 原理：利用细菌天然耐药性 1． O/129抑菌试验 用于弧菌科的属间鉴别，弧菌属、邻单胞菌属对O/129敏感，而气单胞菌属耐药。 2．杆菌肽试验用于A群链球菌与非A群链球群的鉴别。 3．奥普托欣（Optochin）试验主要用于肺炎链球菌与其他链球菌的鉴别。 * * 一、免疫学检测 抗原检测、抗体检测 二、分子生物学检测 核酸杂交、聚合酶链反应、生物芯片技术 三、细菌毒素的检测 内毒素、外毒素 四、动物实验 * * 概念辨析 免疫学检测 免疫学诊断 免疫学反应 免疫学技术 血清学检测 血清学反应 血清学技术 血清学诊断 * * 菌体Ag： IFA、荧光菌球法、凝集试验 游离Ag ： ELISA 　 免疫荧光技术是利用免疫学特异性反应与荧光示踪技术相结合的显微镜检查手段。既保持了血清学的高特异性，又极大地提高了检测的敏感性，在细菌鉴定方面占有重要地位。常用的方法有直接法、间接法和免疫荧光菌球法。 * * 抗体的量常随感染过程而增多，表现为效价的升高。因此用已知的细菌或其特异性抗原检测病人血清中有无相应抗体及其效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。主要适用于抗原性较强的致病菌和病程较长的感染性疾病。 * * 标本：双份血清标本，恢复期比急性期血清标本抗体效价升高≥4倍方有意义 方法 原理：用已知的细菌或其特异性抗原检测患者体液中相应特异性抗体和其效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。 凝集试验： 沉淀试验： 补体结合试验： 中和试验： 肥达试验、外斐试验 梅毒VDRL、RPR试验等 抗链“O”试验等 Q热柯克斯体抗体检测等 * * （一）核酸杂交 DNA可进行变性、复性、杂交。利用这一特性，制备特定序列DNA片段，进行标记后用作探针，在一定条件下，按照碱基互补配对原则与标本中已变性的细菌DNA进行杂交，通过检测杂交信号确定是否发生杂交反应，从而鉴定标本中有无相应的病原菌基因。 探针的种类： 克隆片段DNA探针、寡核苷酸探针、质粒DNA探针、rRNA探针、 * * 2．核酸杂交在临床细菌检测中的应用 （1）细菌分类鉴定 （2）细菌快速鉴定 （3）细菌耐药性的检