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第十二章 细胞增殖及其调控
一、细胞周期概述
(一)细胞周期
细胞周期是指细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分完成所经历的一个有序过程。其间细胞遗传物质和其他内含物分配给子细胞。
细胞周期时相组成:间期(inter phase):G1期、S期、G2期;有丝分裂期(mitosis phase):M期;胞质分裂期(cytokinesis)。
细胞沿着G1→S→G2→M→G1周期性运转,在问期细胞体积增大(生长),在M期细胞先是核分裂,接着胞质分裂,完成一个细胞周期。
细胞周期时间:不同细胞的细胞周期时间差异很大,S+G2+M的时间变化较小,细胞周期时间长短主要差别在G1期。
根据增殖状况,细胞分类三类:连续分裂细胞(cycling cell)、休眠细胞(G0细胞)和终末分化细胞。
(1)连续分裂细胞这类细胞始终保持旺盛的增殖活性,不停地通过G1期及细胞周期各时期,完成细胞分裂,称为增殖细胞。这类细胞代谢水平高,对环境信号敏感,分化程度都比较低,如:胚胎早期的细胞、造血干细胞、上皮基底细胞,它们对机体的建立和组织的更新起了十分重要的作用。
(2)休眠细胞这类细胞可长期停留在G1早期而不越过R点,处于增殖静止状态。它们合成具有特殊功能的RNA和蛋白质,使细胞的结构和功能发生分化,但这类细胞并未丧失增殖能力,在一定条件下可以恢复其增殖状态,但需要经过较长的恢复时间。通常把这类细胞称为G0期细胞。如:肝、肾的实质细胞、血液中的淋巴细胞都属于这类细胞。它们通常处于G0状态,当组织受到损伤或激素的刺激时可重新进入细胞增殖周期。细胞遗传学中常用PHA(植物凝集素)来刺激处于G0状态的淋巴细胞进入细胞周期,从而获得大量分裂期细胞来制备染色体。
(3)终末分化细胞这类细胞的结构和功能发生高度分化,已经丧失增殖能力,终生处于G0期,直到衰老死亡。如:人的红细胞、神经元细胞和骨骼肌细胞等。
(二)细胞周期中各个不同时期及其主要事件
(1)G1期(DNA合成前期)。
从细胞分裂完成到DNA合成开始前的阶段。是DNA合成前的准备时期,也是细胞生长的主要阶段。G1早期由于细胞大量合成RNA和进行核糖体组装,导致结构蛋白和酶的形成,这些酶控制着用于形成新细胞成分的代谢活动。进入G1后期,则主要合成DNA复制所需的前体物质和酶类,如脱氧核苷酸及胸苷激酶等。这一时期细胞体积增大,核仁增大。DNA含量是2c(content)。
(2)S期(DNA合成期)。
从DNA合成开始到DNA合成结束的全过程,一般是6~8小时。S期是DNA进行复制的阶段,使体细胞的DNA含量由2C增加到4C。主要特点是进行DNA复制及合成与DNA复制相关的酶和组蛋白:如:胸苷激酶、胸苷酸合成酶、DNA聚合酶等。同时还合成组蛋白。
(3)C2期(DNA合成后期)。
从DNA合成结束到有丝分裂期开始之前的阶段,是细胞进入有丝分裂前的准备时期。主要特点是有丝分裂促进因子(M-phase promoting factor,MPF)的活化和微管蛋白等有丝分裂器组分的合成,为进入M期作准备。人体细胞的G2期一般要经历2~5小时。
(4)M期(有丝分裂期)。
有丝分裂是遗传传物质已经复制完备的母细胞,进一步将染色质加工、包装成染色体,并把它们均等地分配给成两个子细胞的过程。
(三)细胞周期长短测定
细胞周期的测定方法有:
(1)脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法。
(2)流式细胞仪分选测定法。
(四)细胞周期同步化
自然同步化:如有一种粘菌的变形体plasmodia,某些受精卵早期卵裂。
人工选择同步化:
(1)DNA合成阻断法;
(2)分裂中期阻断法;
(3)条件依赖性突变株在细胞周期同步化中的应用。
(五)特殊的细胞周期
特异的细胞周期是指那些特殊的细胞所具有的与标准的细胞周期相比有着鲜明特点的细胞周期。例如早期胚胎细胞的细胞周期、酵母细胞的细胞周期、植物细胞的细胞周期、细菌的细胞周期。
二、细胞分裂
(一)有丝分裂
1.有丝分裂过程
根据该过程出现的形态学特征,可划分为前期、中期、后期和末期四个时期。
(1)前期(prophase)。这一时期的主要表现是染色体的凝集,分裂极的确定的和核膜、核仁的解体。
(2)前中期(prometaphase)。指由核膜解体到染色体排列到赤道面(equatorial plane)这一阶段。
(3)中期(metaphase)。染色体最大
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