疏水-亲水型硅胶固定化葡萄糖氧化酶研究.PDF

第2 5 卷第3 期 西 安 交 通 大 学 学 报 （医 学 版 ） ol 25 o 3 2 0 0 4 年6 月 Journal of Xian Jiaotong University（Medical Sciences ） Jun 2004 疏水-亲水型硅胶固定化葡萄糖氧化酶的研究 锁爱莉，姚 煜，李恩孝 （西安交通大学第一医院肿瘤内科，陕西西安 7 10061） 摘要：目的 评价疏水-亲水型硅胶作为载体固定化葡萄糖氧化酶的性能，以期制备出能用于临床体液中葡萄糖浓度 测定的生物传感器。方法 以甲基三甲氧基硅（MTMOS ）和 -氨丙基三甲氧基硅烷（APTMOS ）为原料，利用溶胶-凝 γ 胶技术制成了一种疏水-亲水型硅胶，以1- 乙基-3-（3-二甲基氨丙基）-碳二亚胺 ·盐酸（EDC ）和N-羟基琥珀酰亚胺 （NHS ）为催化剂，利用葡萄糖氧化酶（GOD ）分子中的羧基基团与硅胶中氨基基团间的碳二亚胺偶联反应，实现了 GOD 在硅胶上的固定化，考察了固定化GOD 的基本性质。结果 固定化GOD 活力最优时的条件如下：APTMOS 的体 积分数为70% 、给酶量为16 800 U 、最适温度和最适pH 值分别为35 ℃ 和5. 5 ，固定化GOD 具有很好的操作稳定性和 贮存稳定性，其米氏常数K 为9 . 1 mmol ·L - 1 。结论 疏水-亲水型硅胶是一种新型的酶固定化载体，可用于多种酶 m 的固定化。 关键词：酶固定化；葡萄糖氧化酶；疏水-亲水型硅胶；偶联反应 中图分类号： Q814 . 2 文献标识码：A 文章编号：167 1-8259（2004 ）03-0229-04 The study of immobilization of glucose oxidase on hydrophilic-hydropholic silica gel Suo Aili ，Yao Yu ，Li Enxiao （Department of Medical Oncology ，First Hospital of Xi’an Jiaotong University ，Xi’an 710061，China ） ABSTRACT ：Objective o evaluate te erforances of glucose oidase ioilied on ydroilicydrooic silica gel ，ic ay e eloyed to reare glucose sensor for te deterination of glucose in ody fluids Methods e silica gel as reared fro recursors γ ainoroyltrietoysilane （MS ）and etyltrietoysilane （MMS ）y solgel tecniue lucose oidase （ ）as covalently attaced to te silica gel via carodiiide couling reaction eteen a caroylic acid grou on enye and an aine grou of te silica gel under te articiation of te lining reagents 1etyl3（3dietylainoroyl ）carodiiide ydrocloride and ydr