《第7章吸光光度法》-课件设计（公开).pptVIP

* * 混浊试液中组分的测定 ?1 ?2 A A ?1 -A ?2 = △A △A∝c 例 牛奶中微量Fe的测定 选择 入Max测量；选择与入max相差40-m0nm的波长为参比波长 * * 双组分共存时的分别测定 在?2， A?2 = Ax2+Ay2 在?1， A?1= Ax1+Ay1 ?A= A?2 - A?1 = Ax2+Ay2 –(Ax1+Ay1) = Ax2 –Ax1 = ?Ax Ay2 ＝ Ay1 ?Ax =(?x2－ ?x1)bcx 消除了y的干扰 X被测 Y干扰 ?2 ?1 ?1 Ay1 AX1 Ay2 AX2 A ?/nm ′ * * 四. 导数光度分析法（自学） 导数光谱：吸光度随波长变化率对波长的曲线 吸光度的导数值与浓度成正比 * * 7.5.2 方法应用 一.单组分分析： 痕量金属分析 二. 临床分析 三.食品分析 四. 其他应用 一、 弱酸和弱碱离解常数的测定 二、络合物组成的测定 * * 一. 弱酸和弱碱离解常数的测定 HA H＋＋A Ka＝[H+][A]/[HA] 高酸度下，几乎全部以HA存在，可测得AHA=εHA·c(HA)； 低酸度下，几乎全部以A存在，可测得 AA ＝εA·c(HA). 代入整理： 配制一系列c相同,pH不同的溶液,测A(设b=1cm). * * MO吸收曲线 Aa(HL) Ab (L) 1 2 3 4 5 6 Ab 6 5 4 3 2 1 Aa 350 400 450 500 550 600 ?/nm A 曲线 pH 1 1.10, 1.38 2 2.65 3 3.06 4 3.48 5 3.98 6 5.53,6.80 由每份溶液的一对pH、A，可求得一个Ka, 取平均值即可. * * 二.络合物组成的测定 （无机已学） 1.摩尔比法: 固定cM ,改变cR 1:1 3:1 c(R)/c(M) A 1.0 2.0 3,0 * * 2.等摩尔连续变化法: M:R=1:1 0.5 0.33 cM/c cM/c M:R=1:2 * * 条件形成常数的测定 (设M、R均无吸收) 0.5 cM/c M:R=1:1 A0A cM + cR= c MmRn型 ? * * 作业：p337-339. 2，3，4，8， p337.思考题：3，8 * * * 7.3 显色反应及影响因素 一、 显色反应的选择 1 灵敏度高(High sensitivity)，一般ε104 2 有色化合物组成恒定，符合一定的化学式。性质稳定显色条件易于控制，重现性好。 3 显色剂在测定波长处无明显吸收。 对比度好, ?λmax60 nm . 二、显色剂(Color reagents) 无机显色剂: [Fe(SCN)]2+，[TiO·H2O2]2+ 有机显色剂: 7.3.1 显色反应和显色剂(Color reactions) * * 有机显色剂: O －N＝N－，－N＝O， O C=S,－N （共轭双键）πe 生色团（生色团） 能吸收紫外-可见光的基团 有机化合物：具有不饱和键和未成对电子的基团产生n→ π*跃迁和π→ π*跃迁, 跃迁E较低 注：当出现几个生色团共轭，则几个生色团所产生的吸收带将消失，代之出现新的共轭吸收带，其波长将比单个生色团的吸收波长长，强度也增强 * * 助色团 本身无紫外吸收，但可以使生色团吸收峰加强同时 使吸收峰长移（红移）的基团 有机物：连有杂原子的饱和基团 例：—OH，—OR，—NH—，—NR2—，—X * * 红移 由于化合物结构变化（共轭、引入助色团取代基 ）或采用不同溶剂后，吸收峰位置向长波方向的 移动，叫红移(Bathochromic shift）. * * 有机显色剂 CH3－C－C－CH3 HO－N N－OH ＝ ＝ N N OH COOH SO 3 H OO型： N N N O H OH ON型： 4-（2-吡啶偶氮）间苯二酚 PAR N H N H N S N S型： 双硫腙 NN型： 丁二酮肟 邻二氮菲 磺基水杨酸 * * 7.3.2 显色条件的选择 cR cR cR 1、显色剂用量 Mo(SCN)32+ 浅红 Mo(SCN)5 橙红 Mo(SCN)6- 浅红 Fe(SCN)n3-n * * 二、溶液的酸度 pH1pHpH2 pH * * 酸度的影响 pH3.5～5.7为适宜的酸度范围 * * 三、显色时间和显色温度 T1(℃) T2(℃) t(min