蛋白质的排阻色谱复性的新进展.docVIP

蛋白质的排阻色谱复性的新进展 　　蛋白质的排阻色谱复性的新进展 　　3 　　王超展 　 耿信笃 　　33 　　(西北大学现代分离科学研究所 现代分离科学陕西省重点实验室 　 西安 　 710069) 　　摘要 　 外源蛋白在大肠杆菌中高效表达时 , 性是重组蛋白生产过程中的一个技术难题 (,SEC ) 用于蛋 白复性是一种较新的 、 , 它能在高的起始 , 同时又能使目标蛋白得到一定程度的纯化 。对使 用 SEC , SEC 复性的原理及其复性过程中的影响因素 , 并对其 。 关键词 　 包涵体 　 重组蛋白 　 蛋白折叠 　 复性 　 排阻色谱 收稿日期 :2004202224　 修回日期 :20042052113国家自然科学基金资助项目 . 33通讯作者 , 电子信箱 :xdgeng@nwu.edu. cn. 　　重组蛋白在大肠杆菌中的高水平表达经常导 致蛋白聚集而形成不溶的 、 无活性的包涵体 。为 此 , 欲获得天然活性态的目标产物 , 必须对经过脲 或盐酸胍等变性剂溶解后的变性蛋白进行复性 。 目前 , 稀释法是应用最为广泛的复性方法 , 然而其 复性效率很低 , 一般为 5%~20%。色谱法复性是 近年来发展较快的一种蛋白复性方法 , 具有抑制聚 集 , 活性回收率高 , 可以在较高蛋白浓度下复性 , 并 　　且同时可以使蛋白质得到纯化的优点 [1