检测血清ATG浓度ELISA方法建立.PDFVIP

%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%南方医科大学学报(J%South%Med%Univ)%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%2010;30(2) · 374 · 检测血清ATG 浓度ELISA 方法的建立 李真慧，吴秉毅，蒋 玲，李佩恩，郭坤元（南方医科大学珠江医院血液科，广东 广州 510282 ） 摘要：目的建立检测人血清中兔抗人胸腺免疫球蛋白（ATG ）的检查方法并进行初步临床应用。 方法 用鼠抗兔 IgG 单 克隆抗体做固相，辣根过氧化物酶（HRP ）标记的羊抗兔 IgG 多克隆抗体做二抗，建立双抗体夹心 ELISA 方法。 并检测 使用 ATG 的异基因造血干细胞移植患者血中ATG 的浓度。 结果ATG 浓度最低检测值为 31.25%ng/ml ， 在 40~1000% 范围内呈线性关系，组内和组间的变异系数分别为 和 。 用该法测定 例干细胞移植预处理方案中使 ng/ml 7.91% 5.22% 7 用 患者的浓度， 随时间在体内浓度逐渐下降，但预处理后 天仍能测得 ，表明 在体内作用时间 ATG ATG 90 ATG ATG 比较久，可能会影响移植后免疫功能重建。 结论双抗体夹心法具有灵敏性高、特异性强的特点，可用于人血清中ATG 水平的定量测定。 干细胞移植预处理方案中使用 后体内浓度进行性降低， 将会比较长时间在体内起作用。 ATG ATG 关键词：双抗体夹心； ； ；移植物抗宿主病 ELISA ATG 中图分类 ： 文献标识码： 文章编 ： R457 A 1673-4254(2010)02-0374-03 An enzyme-linked immunosorbent assay for determining serum anti-themocyte globulin concentration LI%Zhen-hui,%WU%Bing-yi,%JIANG%ling,%LI%Pei-en,%GUO%Kun-yuan Department%of%Hematology,%Zhujiang%Hospital,%Southern%Medical%University,%Guangzhou%510282,%China Abstract: Objective To%establish%an%enzyme-linked%immunosorbent%assay%(ELISA)%for%determining%anti-themocyte%globulin% (ATG)%levels%in%serum%samples.%Methods The%microplate%was%coated%with%mouse%anti-rabbit%IgG%monoclonal%antibody,%and% sheep%anti-rabbit%polyclonal%antibody%conjugated%with%HRP%was%used%as%the%second%antibody% for%