cult2g对β淀粉样蛋白神经毒性及聚集状态影响的体外实验研究.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 首都师范人学硕+ 首都师范人学硕+学位论文 缩略词表 英文缩写 英文全称 中文名称 AD Alzheimer’S disease 阿尔茨海默病 SP Senile plaque 老年斑 FAD Familial AIzheimer’S disease 家族性阿尔茨海默病 NFT Neurofibirilary tangle 神经纤维缠结 AB Amyloid—B peptide B一淀粉样蛋白 APP Amyloid precursor protein 淀粉样前体蛋白 ROS Reactive oxygen species 活性氧 DMEM Dulbcoco’s Modifled Eagle’S medium Dulbeeeo改良的基础 培养基 FBS Fetal bovine serunl 胎牛血清 HS Horse serum 马血清 PBS Phosphate．buffered saline 磷酸盐缓冲液 PLL poly—L—lvsine 多聚一L一赖氨酸 HEPES N一(2-hydroxyethyl)piperazine-N’一(2一ethanesulfonie aeid) 羟乙基哌嗪乙硫磺酸 DMSO Dimethyl SUlDhoxide 二甲基亚砜 MAP， Mierotubule associated protein 2 微管相关蛋白2 BSA BOvine serum albumin 牛血清白蛋白 Ara-C Cytosine 13．．D．．arabioofuranoside 阿糖胞苷 CD Circular dichroism 圆二色光谱 HFIP l，l，1，3，3，3一hexafluoro一2·propanol 六氟异丙醇 功r 西ioflavin T 硫黄素T OD Optical density 光密度 Abs Absorbance 吸光度 MTT 3一[4，5·dimethylthiazol一2一yl】一2，5一diphenyltetrazolium 噻唑兰 bromide 首都师范大学硕上学位论文摘 首都师范大学硕上学位论文 摘 要 阿尔茨海默病(Alzheimer’S disease，AD)是一种严重危害人类健康的神经退行性疾 患，是老年性痴呆最常见的形式之一。AD的患病风险随着年龄增长而急剧上升，目前尚 未找到行之有效的治疗方法。大量证据表明，p-淀粉样蛋白(p-amyloid peptide，A13)在 AD患者脑内的大量产生、聚集以及沉积而形成老年斑(Senile plaque，SP)，在AD的发 生、发展过程中起了关键性作用。A13是p-淀粉样前体蛋白(Amyloid precursor protein，APP) 的酶解产物，通常由39--42个氨基酸组成，以A13v40和A13lm最为常见。 老年斑中存在异常高浓度的Cu2+，提示cu2+可能参与了AD的发病过程。Cu2+与A13 结合后可能引发两种异常后果：发生氧化还原反应生成H202引起神经元的大量凋亡及促 进All沉积的形成。研究表明氧化应激在AD的发病过程中有重要作用，AD脑组织内发生 大面积的脂质过氧化损伤、脑内积聚大量DNA、蛋白质的氧化产物。本文在细胞培养中将 抗氧化剂VC、VE与A6或Ap／Cu2+络合物共同作用于神经元，结果表明VC、VE均能显 著减轻A13的细胞毒性，但不能完全清除，提示A13弓I发的损伤可能存在除氧化应激外的其 它机制。 目前关于Cu2+与AB存在相关性的证据很多，但精确的共价结合几何学及参与Cu2+结 合的氨基酸位点仍然存在争议。本文实验结果提示His6、Hisl3、Hisl4位点是AB上的cu2+ 结合位点，Tyrl0的酚羟基是否为A13与cu2+结合提供O原子仍不清楚。细胞学实验提示 Met35是Ap神经毒作用的关键位点，但Ap与Cu2+的结合过程不涉及Met35。 本文通过圆二色光谱、荧光光谱及光密度实验分析加入cu2+后对A13的结构与聚集状 态的影响，结果提示无论是否加入Cu2+，野生型Ap结构中p．沉积含量均较低，可溶性Ap 寡聚物可能进一步聚合形成无定形沉积。综上，A13纤维状沉积与A13i；l发的氧化损伤及神 经毒性呈负相关性，可溶性A13寡聚物可能是造成AD脑组织中大量神经细胞凋亡的源头。 关键词：阿尔茨海默病(AD)；p一淀粉样蛋白(Ap)；氧化应激；细胞毒性；Ap沉积；二 级结构 2 首都师范大学硕七学位论文Abstract 首都师范大学硕七学位论文 Abstract Alzheimers disease(AD)，a progressive neurodegenerafive disorder characterized by irre