光谱分析基础及紫外-可见光分光光度计.pptVIP

四、紫外-可见分光光度计性能评价指标 (一)波长准确度和波长重复性 (二)光度准确度 (三)光度线性范围 (四)分辨率 (五)光谱带宽 (六)杂散光 (七)基线稳定度 (八)基线平直度 五、紫外-可见分光光度计常见故障及排除方法 分光光度计常见故障包括光路、电路故障。根据故障不同应采取不同的排除措施。 接通电源后，指示灯不亮，仪器不工作，可能是电路故障； 读数表不能调零（即0％T）和不能置100％T则可能是光路故障或微电流放大器损坏。 需根据具体情况采取不同的处理方法。 作业： 已知某化合物的相对分子质量为251，将此化合物用乙醇做溶剂配成浓度为0.15mol/L的溶液，在480nm波长用2.0cm吸收池测得透光率为39.8%，求该化合物在上述条件下的摩尔吸收系数及比吸光系数a？ * 白光(太阳光):由各种单色光组成的复合光. 波长越长，折射率越小 * * 波长越短，频率越高，能量越大。 * 辐射指的是电磁辐射,电磁辐射包括从x射线到无线电波的所有电磁波谱范围.电磁辐射与物质相互作用的方式有发射/吸收/反射/折射/散射/干涉/衍射/偏振等. * 只有光子的能量与被照射物质粒子的基态和激发态能量之差相等时，才能被吸收。不同物质的基态和激发态的能量差不同，选择吸收光子的能量也不同，即吸收的波长也不同。因此不同物质选择性吸收不同能量的外来辐射，这是吸收光谱分析法的基础。 * 不同物质的基态和激发态的能量差不同，选择吸收光子的能量也不同，即吸收的波长也不同因此不同物质选择性吸收不同能量的外来辐射，这是吸收光谱分析法的基础。 * 如一束白光通过高锰酸钾溶液时，绿光大部分被选择吸收，其他的光透过溶液，从互补色示意图来看，溶液呈现紫色。 * 如果溶液浓度以物质的量的浓度表示时，此 常数称为摩尔吸光系数，它表示在一定浓度下测得的液层厚度为1cm，溶液浓度c为1mol/l时的溶液吸光度值。 * 应选用?max处或肩峰处测定 * * * * 钨灯：靠将钨丝加热至白炽状态而发光，它的光谱分布与工作温度有关。钨丝易蒸发沉积在内壁，使用寿命1000h。卤钨灯：常用作可见光分光光度计的光源 * 单色器是分光光度计的关键部件。单色器的性能直接影响射出光的纯度，从而影响测定的灵敏度、选择性及校正曲线的线性范围。单色器的好坏主要取决于色散元件的质量。 * 当色散元件受波长机构调节而偏转时，色散后的光便垂直与狭缝作扫描运动。只有波长范围很窄的的单色光从狭缝中透出，其余光被挡在狭缝之外。 * 棱镜是根据透明物质（如玻璃、石英）的折射率和光的波长有关性质而工作的 * 光的可逆性 * 吸收池应具有良好的透光性和较强的耐腐蚀性。 * 根据光的吸收定律，被测物质的量一定时，被测量的浓度越高，光程越长，得到的吸光度越大，但光程长需要的溶液体积大，浓度高需要体积小，所以提高吸光度很难实现，所以吸收池做的狭长， * 中央阳极式光电管。玻璃泡内的一半内壁上涂以金属膜作阴极，阳极一般为一圆环形，位于玻璃泡的中央，使用时在阳极和阴极之间加上几十至几百伏的电压。在没有光照射时，光电管内无电流通过，当有光照射阴极K时，阴极便发射电子，在所加电压产生的电场的作用下，电子奔向阳极，经外回路后，又返回阴极。这样便在电路中出现了电流。 * 不用外接电源，当光通过金属膜照射到半导体上时，半导体中处于束缚状态的电子吸收了光子的能量后，成为自由电子，这时可以顺利地通过阻挡层到金属膜上。因此，在金属膜电极上便积累了较多的电子带负电，另一极由于失去电子积累了较多的空穴，这样就产生了“光生电动势”。 * 目前，许多精密的紫外-可见分光光度计都装配有计算机系统，一方面可对分光光度计进行操作控制，另一方面可将检测数据直接显示在CRT或液晶显示屏上，并对数据进行记录、处理，可在打印机上直接打印，也可将数据传送至网络计算机。 * * * 这是目前国内使用最多、性能最完善的一类分光计 * 可同时对检测样品和参考样品进行测定，还可自动补偿检测时因条件的随机变化或样品中非测定组分的干扰所引起的影响，更方便、准确 * * 400nm-800nm为可见光区 * 200nm-400nm为紫外光区，工作波段在200nm－800nm之间的分光光度计称为紫外－可见光分光光度计 * 分光光度计是由光、机、电等几部分组成的精密仪器，为保证仪器测定的数据正确可靠，不仅应注意正确安装调试，按操作规程使用、保养等，还应了解并能排除仪器的常见故障。 棱镜色散示意图 光 栅 色散均匀、谱线清晰、工作波段宽是棱镜无法比拟的 原指大量等宽、等间距的平行狭缝所组成的元件 实际所使用的光栅多为反射型复制光栅，它是在平面玻璃上黏结上一定角度刻槽的铝反射膜而制成 准直镜 为一凹面反射镜 若一束平行与主轴的近轴光线，射到凹面镜上时，它的反射光