多浆旱生植物霸王液泡膜H+-PPase基因片段的克隆及序列分析.pdfVIP

第 卷 第 期 草 业 学 报 ２０ １ １１９－１２４ 　 　 　 　 ， 　　 年 月 Ｖｏｌ．２０Ｎｏ．１ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ ２０１１ ２ 多浆旱生植物霸王液泡膜 ＋ 犎 犘犘犪狊犲 基因片段的克隆及序列分析 席杰军，伍国强，包爱科，王锁民 （兰州大学草地农业科技学院，甘肃 兰州 ７３００２０） 摘要：根据其他植物 ＋ 基因的保守序列设计一对简并性引物，以霸王叶片总 为模板，采用 Ｈ ＰＰａｓｅ ＲＮＡ ＲＴ－ＰＣＲ 的方法扩增出 ＋ 基因片段并克隆到 载体。阳性克隆经 鉴定后进行测序，序列分析结果表 Ｈ ＰＰａｓｅ ＰＵＣｍＴ ＰＣＲ 明，克隆到 个同源的序列片段（ ），编码 个氨基酸；所得序列与 中注册的高等植物 ＋ ３ ８９８ｂｐ ２９９ ＧｅｎＢａｎｋ Ｈ ＰＰａｓｅ 基因核苷酸序列的同源性均在 ６９％以上、氨基酸序列的同源性达 ７８％以上。 关键词：霸王； ＋ 基因；克隆；序列分析 Ｈ ＰＰａｓｅ 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｑ９４３．２ Ａ １００４５７５９２０１１０１０１１９０６ 　　 　　  盐分和干旱是导致农作物减产的主要非生物因素，土壤中过高浓度的 ＋ 会造成植物的生理干旱，扰乱细 Ｎａ 　 ［］ １ ＋ 胞的离子平衡，导致膜功能失调和代谢活动的减弱，从而抑制生长并最终导致细胞死亡 。植物细胞抵御 Ｎａ ［］ ＋ ＋ ２ ＋ ＋ 毒害的主要策略有 的外排和 的区域化 。这 个过程分别由分布在质膜和液泡膜上的 ／ 逆向 Ｎａ Ｎａ ２ Ｎａ Ｈ ＋ ＋ ＋ 转运蛋白实现。已有研究表明，液泡膜 ／ 逆向转运蛋白在液泡膜 （ ）和液泡