马铃薯遗传转化体系的优化及无机件焦磷酸酶基因导入的研究-作物遗传育种专业毕业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 甘肃农业大学2008 甘肃农业大学2008届硕士学位论文 摘 要 马铃薯(Solanum tuberosum L．)是重要的粮菜兼用和工业原料作物。马铃薯块 茎的休眠和发芽对于马铃薯的栽培、块茎生产和加工工业都极为重要。由于对块茎 休眠和发芽机理了解的欠缺，人工调控技术发展缓慢，从而严重制约了马铃薯种薯 生产的发展和块茎作为工业加工原料的充分利用。因此，研究块茎休眠和发芽的分 子机理及调控，对于马铃薯栽培、贮藏保鲜和产业发展等具有十分重要的意义。 无机焦磷酸酶(pyrophosphatase，PPase)是以无机焦磷酸(pyrophosphate，PPi) 为底物的水解酶，PPi也是联系马铃薯块茎细胞质和质体中蔗糖降解、淀粉合成以及 淀粉贮藏器官中糖酵解代谢的纽带，蔗糖代谢在两步酶促反应中需要PPi。因此，通 过调控细胞质中的PPi可以实现对马铃薯块茎休眠与发芽特性的调控。 本研究的主要目的是构建马铃薯无机焦磷酸酶(PPase)基因的植物表达载体， 并对农杆菌介导的马铃薯试管薯遗传转化体系进行优化，然后将PPase基因导入马铃 薯栽培品种中，以期对马铃薯块茎的休眠和发芽特性进行调控。取得的主要研究结 果如下： 1．将马铃薯PPase基因与原核表达载体pET．28a融合，构建了原核表达载体 pET．PPA，然后导入大肠杆菌BL21(DE3)中，经SD