南京大学分子生物第16讲.pptVIP

三、阻遏蛋白与操作子的相互作用 （一）操作子上与阻遏蛋白结合的位点 1，lacI基因的表达特点 2，lac操作子（lacO）与阻遏蛋白的结合 （1）阻遏蛋白与lacO结合的实验证据 （2）lacO与阻遏蛋白结合的位点及其结构 A，DNA内切核酸酶消化实验证明：受阻遏蛋白保护区域位于-5 ~ +21(26bp) B，阻遏蛋白保护位点 C，lacO 的结构及其与阻遏蛋白的结合性质 3，阻遏蛋白对RNA聚合酶功能的影响 （1）阻遏蛋白和RNA聚合酶可同时与DNA结合 （2）阻遏蛋白与DNA的结合能增强RNA聚合酶结合启动子的能力（RNA聚合酶与的平衡常数从1.9*107增加到2.5*109） （3）阻遏蛋白有效地使RNA聚合酶与lac启动子上形成一个很强的关闭式的转录起始复合物，阻止转录的起始 （4）阻遏蛋白的这种作用对操纵元的诱导也有促进意 4，上述模式不一定适用于其他系 （二）阻遏蛋白上与操作子结合的位点 1，阻遏蛋白单体的结构 （1）长头片段（long headpiece） （2）短头片段 （3）核心片段（core） （4）铰链区 2，阻遏蛋白四聚体的结构 3，阻遏蛋白与操作子的结合 4，阻遏蛋白需要组成四聚体才能实现完全的阻遏作用 （1） lac系统存在多个操作子 （2）阻遏蛋白四聚体可以同时与两个操作子结合 （3）阻遏蛋白结合第二个操作子影响阻遏的水平 （三）阻遏蛋白与操作子的