HA纳米载体转hG-CSF HepG2疫苗联合低剂量顺铂抗肝癌荷瘤鼠的实验观察.docxVIP

分类号—— 分类号—— 密级 学校代码——10542 学号 2Q12Q22Q15垒l HA纳米载体转hGM—CSF HepG2疫苗联合 低剂量顺铂抗肝癌荷瘤鼠的实验观察 Effects of HepG2 Tumor Vaccine Transfected hGM．CSF Gene Mediated by HA Nanoparticles Combined with Cisplatin 指导教师姓名、职称 迭睦塑 整撞 学 科 专 业 凼盘堂 研 究 方 湖南师范大学学位评定委员会办公室 二。一五年五月 万方数据 摘要目的：联合应用HA纳米转GM—CSF 摘要 目的：联合应用HA纳米转GM—CSF HepG2疫苗与顺铂治疗Hu—PBL— SCID荷瘤小鼠模型，应用肝癌动物模型来研究肝癌疫苗免疫治疗荷 瘤小鼠的效果，同时比较肝癌疫苗联合不同剂量顺铂化疗对肝癌的 治疗效果，以期探讨肝癌治疗的新方法以及最佳方案，为寻找合理 和规范的化疗与肿瘤疫苗联合应用方案提供依据，使免疫化疗方案 为人类肿瘤的治疗提供希望和战胜癌症的信心。 方法：制备HA纳米转GM—CSF HepG2疫苗以及建造Hu—PBL-SCID荷 瘤小鼠模型，并测量裸鼠肿瘤尺寸，然后将符合成瘤标准的荷瘤小 鼠随机分为采用不同方案进行治疗的以下四组，每组5只： (1)对 照组：仅以生理盐水0．2 ml／只注射小鼠腹腔，每天一次，连续14 天； (2)疫苗组：予以转hGM—CSF HepG2疫苗(1x107／m1)0．2 ml／ 只注射右侧背部皮下，7天后再重复注射一次； (3)小剂量顺铂联 合疫苗组(简称LDM联合组)：2mg／(kg．d)顺铂注射小鼠腹腔， 每天一次，连续3天后给予转hGM—CSF HepG2疫苗(1×107／m1) 0．2 ml／只注射右侧背部皮下，7天后再重复上述步骤； (4)最大 耐受剂量顺铂联合疫苗组(简称MTD联合组)：顺铂9mg／(kg．d) 一次性注入小鼠腹腔，3天后予转hGM—CSF HepG2疫苗(1×107／ m1)O．2 ml／只注射右侧背部皮下，7天后再重复上述步骤。通过以 下指标对各组HepG2荷瘤小鼠治疗后的疗效进行检测： (1)采用 万方数据 MTT法(噻唑蓝比色法)检测各组小鼠脾细胞CTL活性； MTT法(噻唑蓝比色法)检测各组小鼠脾细胞CTL活性； (2)采用 ELISA方法检测各组小鼠血清TGF-Q、INF—Y水平以及脾指数。 (3)观察小鼠体质量及毒副反应； (4)测小鼠瘤体积、瘤质量及 抑瘤率； 结果： (I)转基因肿瘤疫苗与Hu—PBL—SCID荷瘤小鼠模型制备成 功。 (2)各组小鼠的CTL杀伤活性以LDM联合组为最强，差异具有 统计意义(PO．05)；疫苗组以及MTD联合组的CTL杀伤活性比对 照组强(P0．05)。 (3)各组小鼠血清的TNF—a、IFN_Y水平及 脾指数以LDM联合组为最高，与其他各组比较有统计意义 (P0．05)。 (4)各组小鼠体重在处理前无差异，MTD联合组小鼠 在处理后体重较其他各组轻(P0．05)，疫苗组以及LDM联合组体 重较对照组无差异。 (5)LDM联合组小鼠瘤体积、瘤重均较其他各 组小(P0．05)，抑瘤率显著高于其他各组(P0．05)。 结论： HA纳米材料转hGM-CSF HepG2疫苗联合小剂量顺铂化疗具 有协同抗肝癌作用。 关键词：免疫化疗治疗；肝癌；肿瘤疫苗；顺铂；粒一巨噬细胞集落 刺激因子 万方数据 ABSTRACTObjective：To ABSTRACT Objective：To investigate the treatment effects of HepG2 tumor vaccine transfected hGM—CSF gene mediated by HA nanoparticles combined with different doses of cisplatin into liver cancer in order to provide evidence for the best solution for liver cancer treatment thus increase our hope and confidence to conqure human tumor． Methods：Establish Hu—PBL—SCID HepG2 tumor—bearing mice．When the xeno grafted to over 1 00 inrn3，mice were randomly divided into 4 groups，five rats each group：(1)control group