葡萄wrky3参与对株生长调控及对aba的应答8976506.docVIP

毕 业 论 文（设计） 题 目： 葡萄WRKY13参与对植株生长调控  及对ABA的应答 PAGE \* MERGEFORMAT PAGE \* MERGEFORMAT 1 目 录 中文摘要……………………………………………………………………………………….1 Abstract…………………………………………………...…………………………………2 引言…………………………………………………………………………………………4 1 材料与方法6 1.1 实验材料6 1.1.1菌株及载体6 1.1.2 常用酶、化学药品、试剂盒6 1.1.3 实验仪器6 1.2 实验方法6 1.2.1 材料培养6 1.2.2 材料处理6 1.2.3 培养基的配置7 1.2.4 重组质粒的鉴定 1.2.5 根癌农杆菌（GV3101）感受态细胞的制备及转化 1.2.6 花芽浸蘸法转化拟南芥及阳性植株的筛选 1.2.7 气孔开度测定 1.2.8 实时定量PCR 2 结果与分析9 2.1 葡萄WKRY13的异源表达植株的获得9 2.1.1 p-Super1300-WRKY13 2.1.1.1 p-Super1300-WRKY13重组质粒的菌落PCR鉴定 2.1.1.2 p-Super1300-WRKY13重组质粒的酶切鉴定10 2.1.2 p-Super1300-WKRY13重组质粒转入农杆菌菌落PCR鉴定10 2.1.3 转基因植株的筛选11 2.1.4 转基因植株的PCR鉴定11 2.1.5 转基因植株的WRKY13基因相对表达量11 2.2 葡萄WRKY13异源表达植株生长的变化12 2.2.1 葡萄WRKY13异源表达植株的种子萌发率12 2.2.2 葡萄WRKY13异源表达植株根系的生长13 2.2.3 葡萄WRKY13异源表达植株主根的长度13 2.2.4 葡萄WRKY13异源表达植株侧根的数目14 2.2.5 葡萄WRKY13异源表达植株侧根的长度14 2.3 葡萄WRKY13异源表达植株对ABA的应答反应14 2.3.1 ABA对WRKY13异源表达种子萌发率影响15 2.3.2 ABA对WRKY13异源表达植株根系生长影响15 2.3.3 ABA对WRKY13异源表达植株气孔开度的影响16 2.3.4 葡萄WRKY13异源表达植株ABA相关基因的表达量16 3 讨论17 致谢19 参考文献20 PAGE \* MERGEFORMAT PAGE \* MERGEFORMAT 2 葡萄WRKY13参与对植株生长调控及对ABA的应答 摘要：葡萄作为一种具有高营养价值和经济价值的果树，对探明其生长发育的机制，提高产量和品质具有极为重要的现实意义。研究表明，转录因子和脱落酸(abscisic acid，ABA) 都能参与调控拟南芥植株生长发育，并且二者存在着联系，但尚未见葡萄转录因子WRKY13与ABA在调控植物生长发育作用的报道。本实验综合应用植物生理学和分子生物学等现代生物学技术，获得WRKY13异源表达植株，探究了葡萄WRKY13对植物生长发育的影响以及对ABA的应答反应。结果表明：葡萄WKRY13异源表达植株的种子萌发延迟，侧根数目增多并且种子萌发、根系和气孔表现出对ABA的不敏感性，ABA能够显著提高WKRY13异源表达植株的ABA合成基因（ABA1、ABA2）和其信号途径的相关基因（ABI1、ABI3）的表达量，但差异不显著。 关键词:葡萄;WRKY13;脱落酸;生长发育 VvWRKY13 regulates plant growth and responds to ABA Student majoring in biological sciences Sun changming Tutor Prof. Liu Xin Abstract: As a kind of high nutritional and economic value of fruit trees, grapes has very important practical significance to prove its growth mechanism and to improve the yield and quality. Previous study has shown that WRKY transcription factors and the plant hormone abscisic acid (ABA) in A