实验四是五六球菌.pptVIP

实验四 球菌 引起人类化脓性感染的主要细菌，又称化脓性球菌 常见有： 葡萄球菌属 链球菌属 肠球菌属 奈瑟菌属 菌种 葡萄球菌属：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球 菌、腐生葡萄球菌 链球菌属：甲型溶血型链球菌、乙型溶血性链球菌、肺炎链球菌 奈瑟氏菌属：微黄奈瑟氏菌 肠球菌属 葡萄球菌属 菌种： 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 实验目的 掌握葡萄球菌属的分离培养方法与鉴定方法 掌握葡萄球菌属的菌落特点 菌体形态及染色性 实验内容 细菌菌落形态及色素的观察 做GS染色，镜下形态的观察 接种血平板，观察细菌的生长表现、色素及 溶血 　　　　　　 生化反应： 1.触酶试验 2.血浆凝固酶试验 3.甘露醇试验 实验器材 菌种、血平板、血浆、3%H2O2、甘露醇培养基、滤纸片、玻片、擦镜纸、吸水纸、污物缸等 葡萄球菌镜下形态的观察 生化反应 触酶试验： 原理：某些细菌能产生过氧化氢酶，将对细菌有害的H2O2 分解成H2O、O2 方法：在洁净载玻片上，滴加3% H2O2溶液1~2d,用接种环 挑取普通琼脂上的菌落，观察结果。 结果：产生大量气泡者（+），不产生气泡者（—） 鉴别：葡萄球菌（+）、链球菌（—） 血浆凝固酶试验： 原理：金黄色葡萄球菌能产生血浆凝固酶，可使血浆中可溶性的纤维蛋白原变为不溶性的纤维蛋白，结合型血浆凝固酶附着于细菌表面，在玻片上形成凝块；游离型的血浆凝固酶则可使试管中的血浆发生凝固。试管法37 ℃孵育0.5h. 方法（玻片法）： 对照区 试验区 甘露醇发酵试验： 原理：致病性葡萄球菌多能发酵甘露醇产酸，使培养基 由紫色变为黄色 方法: 将3种细菌分别接种于甘露醇发酵管，35℃孵育 18~24h,观察结果。 结果判断：培养基浑浊，由紫色变为黄色（+） 仍为紫色（--） 鉴别： 金黄色葡萄球菌（+） 表皮葡萄球菌（--） 腐生葡萄球菌（--） 思考题： 为什么甘露醇试验阳性是黄色？ 链球菌属 菌种： 甲型溶血型链球菌 乙型溶血型链球菌 肺炎链球菌 实验目的 掌握链球菌属的分离培养与鉴定方法 掌握链球菌的菌落特点、菌体形态及染色性 实验器材 菌种、GS染液、血平板、菊糖发酵管、10%去氧胆酸钠溶液、optochin药敏纸片、杆菌肽药敏纸片、小鼠、1ml注射器、剪刀镊子、滤纸片、玻片、吸水纸、擦镜纸、牛皮纸、棉签等 实验内容 细菌菌落形态及溶血的观察 做GS染色，镜下形态的观察 生化反应试验： 1. 杆菌肽敏感试验 2. CAMP试验 3. Optochin试验 4. 胆汁溶菌试验 5. 菊糖发酵试验 6. 小白鼠毒力试验 细菌菌落形态及溶血的观察 1.灰白色、圆形凸起、表面光滑、边缘整齐的针 尖样大小菌落，菌落周围出现不同的溶血 2.根据血平板上的溶血情况分： 细菌镜下形态观察 生化反应 1.杆菌肽敏感试验： 原理：A群化脓性链球菌对杆菌肽几乎 100%敏感， 而其他 链球菌对杆菌肽通常耐药。故此试验可对A群化脓性 链球菌进行鉴别。 方法：挑取被检的链球菌菌落，密集涂布于血琼脂平板上， 将杆菌肽纸片贴于血琼脂平板上，35℃孵育18~24h 观察结果(培养不需要放CO2)。 结果：在杆菌肽纸