基于pdms的红细胞变形性微通道芯片研究-生物医学工程专业论文.docxVIP

重庆大学硕士学位论文 1 绪 论  PAGE 4 胞膜的力学性质研究，常用的有微孔滤筛法、微管吮吸法、底部附着或纤维拦截 法等；后者主要是利用血液几何系统内，由于流动的红细胞发生变形，引起血液 的某些物理特性(如粘滞性、透光性、导电性和声传导性等)的变化，并由此找出应 力与应变之间的关系，从而评估不同状态下红细胞群体的平均变形性，常用的有 粘性测量法、激光衍射法、离心沉降法、电测量法等。 1.2.2 基于微通道的红细胞变形性测量技术发展 1992年，日本教授Kikuchi等人最先提出一种微通道内细胞流动的可视化系统， 用流量与时间的关系研究红细胞悬浮液的通过流速，用此流速表征红细胞的变形 特性，并开始将影像装置作为辅助手段引入到测量系统中，实现对红细胞变形现 象的直接观察。在芯片以硅作为材料，结构上先后采用了等边三角形和等边梯形 槽两种不同的结构。梯形???结构在沟道的出入口处分别加入了一段血流进出的平 台，比三角形沟道更真实的模拟了血管形态，而他的推导和实验也进一步证明了 进出口平台在流路系统和测量观察上具有相当有益的作用。该系统是硅微通道红 细胞变形技术的完整实现，Kikuchi还对比了此通道结构测量值与核孔滤膜的差异， 说明了微通道技术完全可以替代核孔滤膜法的功能，测量简单，可获得较多的细 胞流变信息，且具有很多自己的优点。之后，他还研究了红细胞变形性和氧传输 等生理现象的关系，并把该技术的应用范围扩大到研究血小板流变特性[2-4]。 1997年，Sutton等人在流路控制系统中加入了精确的负压调节装置，并且在硅 基晶片方面采用了宽3～4μm、变化间隔0.2μm、长100μm的矩形槽作为通道结构， 成功设计了一个具有完整控制和处理系统的硅微通道实验仪器[5]，如图1.1所示。 图 1.1 流路系统示意图 Fig.1.1 Structure of the macrofluidic system  1998年，Tomoya等人利用晶体材料来制作成并列的两两相对的微通道，微通 道长130微米，深9.1微米，总共有50个通道，透过透明的盖玻片可以直接观察到通 道里红细胞流过的全过程，通过显微镜对目标区域放大，再用处理速度能达到1000 帧/秒的高速摄像头采集图像，处理后能从图像上直观地观察到红细胞通过时产生 的形变情况[6]。微通道结构示意图如图1.2所示。 图 1.2 微通道示意图 Fig.1.2 Structure of microchannels 2001年，Kosuke等人在Tomoya的基础上改进了整个微通道红细胞变形性检测 系统的外置驱动等设备，他们运用Tomoya所设计的微通道，结合高速摄像系统， 采集到了红细胞过通道的过程[7]，如图1.3所示。 图 1.3 不同速度红细胞过通道示意图 Fig.1.3 (a)Low-and high-magnification images of flowing RBCs The velocities in(b)and (c)are 2.13 and 1.07mm/s respectively. Kosuke的实验和研究提出了用红细胞变形性指数DI来比较和描述红细胞的变 形性，定义DI为：  其中l、d如图1.4所示。 DI＝l/d 式(1.1)  图 1.4 变形指数DI的计算 Fig.1.4 Deformation index calculating Natanel Korin等人在2007年发表的文中提出基于细胞几何学和细胞力学建立 的一套理论模型，并且制作了基于微通道的系统来实现这一模型。该理论模型用 于预测红细胞的变形性，得出红细胞变形性会随着红细胞尺寸的增大而增大的结 论。他们用玻璃制作的微通道深50μm，宽300μm，用注射泵将红细胞悬浮液灌注 到微通道中，并利用高速摄像系统来拍摄通道内情况。实验发现，红细胞在微通 道中流动基本上集中在通道的中间，并一直维持这种空间分布的特征[9]。 2007年湖南大学利用在东京大学制成的玻璃微流控芯片进行血液分析。基于 芯片的滤孔结构对红细胞的吸附作用，结合微滤结构，建立了一种利用滤孔型芯 片对红细胞变形性检测的方法。红细胞在流体的压力作用下会产生变形，使得它 能部分进入到1μm深的滤孔中而被吸附。红细胞因其良好的变形性可以吸附在滤孔 中，不同变形性的红细胞在滤孔中吸附的数目也不同，因此可以通过计数方法对 红细胞变形性进行检测。这种方法简单快速，由于白细胞不会吸附到滤孔中，对 其测量结果没有影响，因此不需要对血液进行预处理，因此也可作为一个单元与 其它血液分析芯片单元相集成[10]。 实验所用的滤孔型芯片结构如图1.5(a)所示，由两条不等宽的平行通道滤孔型 微流控芯片两个通道组成。通道宽度分别为200μm