根癌农杆菌对甘蓝型油菜转化及转基因植株再生.pdfVIP

植　物　学　报　1994, 36 (9) : 657—663 A ct a B ot an ica S in ica 根癌农杆菌对甘蓝型油菜的转化 及转基因植株的再生 程振东　卫志明　许智宏 ( 中国科学院上海植物生理研究所植物分子遗传国家重点实验室, 上海 200032) 摘　　要 用根癌农杆菌( ) 共培养法把外源基因导入甘蓝型油菜( A g robacter ium tum ef aciens B rass i ca nap us L. ) 主要栽培品种“云北 2 号”, 获得转基因植株。所用外植体为带有 1—2 mm 子叶 柄的完整子叶, 根癌农杆菌为 208 ( 37 , 93) 。 质粒 93 带有 A SE p T i T SE pROA T i pROA N P T 及 嵌合基因。共培养 2 天后转到附加 25 卡那霉素的分化培养基( + 4 5 GU S m g L M S m g L ) 上。 和羧苄青霉素促进芽的分化, 头孢霉素则有抑制作用。最高转化频率为 BA P A gN O 3 27% 。把分化出的茎芽切下, 插入含有 25 卡那霉素的生根培养基中。羧苄青霉素不利 m g L 于根的形成。把完整抗性植株移入盛土壤的盆中, 生长状况良好。测定 葡糖苷酸酶活性, 84% 明显高于对照。以N P T 基因作探针进行 Sou th ern b lo t 分析, 证实外源基因已插入到植 物细胞基因组中。 关键词　甘蓝型油菜; 根癌农杆菌; 转基因植株 TRANSFORM A T ION OF B RA SS ICA N A PU S USINGAGROBAC- TER IUM TUM E FAC IEN S AND REGENERA T ION OF TRANSGEN IC PLANTS Ch eng Zh en dong W ei Zh i m ing and Xu Zh i hong N a tiona l L abora tory of P lan tM olecu lar Genetics S hang ha i I ns titu te of 200032 P lan t P hy s iology A cad em ia S in ica Shanghai Abstract . . 2 Seed s of B rass ica nap us L cv Yunbei w ere su rface ster ilized and germ inated on 　收稿 日期: 1993020 1　接受日期: 1993053 1 　 “863 ”计划资助课题。