《荧光光度法》-课件设计(公开).pptVIP

第九章 分子荧光光度法 分子荧光光度法概述 去活过程及荧光和磷光的产生 物质分子结构与荧光的关系 环境对荧光的影响 荧光定量分析方法 荧光分光光度计 概 述： 一种物质能否发射荧光，取决于它 的分子结构和它所处的环境条件。 概 述： 分子结构：分子中含有共轭双键体系，具 有吸收辐射能，产生电子跃迁 的能力。 环境条件：适当的辐射能照射，温度、溶 剂、酸碱度等。 概 述： 荧光光谱的范围较广，可以从X光到红外光谱区。 某些物质受紫外光照射后能发射比吸收的紫外光波长更长的紫外光荧光或可见荧光。 基本概念： 用 途 荧光光度法的特点： 优点：灵敏度高，可达 ng/ml ；选择性强， 重现性好；取样少；可提供较多物理 参数。 缺点：许多物质本身不能发射荧光，因此， 应用不够广泛。 荧光法与UV-Vis法的比较： 相同点： 都需要吸收紫外-可见光，产生电 子能级跃迁。 荧光法与UV-Vis法的比较： 荧光和磷光光谱法 激发态 第一激发态最低振动能级 基 态