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- 2018-12-22 发布于浙江
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第八章 新陈代谢总论与 生物氧化 三、新陈代谢的研究方法 1.研究对象:大肠杆菌、大肠杆菌噬菌体、四膜虫、小球藻、果蝇、鸽、兔、小鼠、大鼠 2.研究方法: 使用酶的抑制剂: 利用遗传缺欠症:先天性基因的突变,缺乏某一种酶. 同位素示踪法:常用稳定同位素:2H,15N,13C,18O (例: DNA半保留复制) 常用放射性同位素:3H,32P,14C (例三羧酸循环) 苯环化合物示踪法:苯甲酸和苯乙酸(例:脂肪酸β-氧化) 核磁共振波谱法 3.研究水平 体内(in vivo):生物整体,整体器官,微生物细胞群 体外(in vitro):组织切片,匀浆液,提取液 体内研究(in vivo) 体外研究(in vitro) 1、利用酶的抑制剂 代谢途径受阻导致代谢中间产物的积累 碘乙酸——3-磷酸甘油醛脱氢酶 氟化钠——烯醇化酶 黑色素是吲哚醌的聚合物 白化病(albinism)缺乏酪氨酸酶 代谢组学的兴起 四、生物系统遵循热力学定律 一个体系及其周围环境的总能量是一个常数。 能量可以在系统内转移,或从一种形式转化为另一种形式。 有机化合物氧化时释放的能量等于该物质所具有的化学键能与其氧化产物所含化学键能之差。 熵(entropy)表示一个系统的无序或随机程度。 常用?G(自由能的变化)衡量一个生物化学过程是否能够自发进行:?G= ?H-T?S ?Go: 当反应物浓度为1 mol/L,反应温度为25℃,压力为1大气压时,用?Go表示标准自由能变化。 ?Go?:生物化学反应时,将pH定为7.0,这种状态下的标准自由能变化用?Go?表示。 (一)高能化合物和高能键 (二)能量与磷酸基的转移 (三)ATP循环 高能化合物:在生化反应中,某些化合物随水解反应或基团转移反应可放出大量自由能。 高能磷酸键 生物化学中,把磷酸化合物水解时释出的能量20KJ/mol者,其所含的磷酸酯键称为高能磷酸键(energy-rich phosphate bond),以 表示。 高能硫酯键 由酰基和硫醇基构成,例如乙酰CoA、脂酰CoA和琥珀酰CoA等。 几种常见的高能化合物 1、ATP的利用方式 (1)末端磷酸基(?)与部分能量同时转移给反应物。 ATP + 6-磷酸果糖 1,6-二磷酸果糖 + ADP (2)ATP水解为ADP及Pi,释放的能量供离子转运、 肌肉收缩、羧化反应等,但磷酸基并不出现于 反应物中。 ATP + 丙酮酸+ CO2 ADP + Pi + 草酰乙酸 (3)ATP的另一个高能磷酸键(?)被利用,生成 PPi。 ATP + 脂肪酸+ HSCoA 脂酰CoA + AMP + PPi ATP + 氨基酸 氨基酰 ~ AMP + PPi ATP循环的概念 在ATP水解成ADP时,释出的自由能驱动那些需要加入自由能的吸能反应;ADP 与 Pi又可利用营养物经生物氧化时产生的能量重新磷酸化为ATP,这样构成的循环称为 ATP循环。并与细胞内进行的能量转换有关,故又称细胞能量循环(cell energy cycle)。 ATP 循环的生物学意义 (1)生物体内能量转换最基本方式。 静息时,一个成人24小时消耗ATP可达到40Kg,但细胞内ATP的浓度仅几个mol/L,ADP和Pi的含量也非常有限。 (2)磷酸盐在物质代谢的重要作用。 主要表现在:糖酵解过程中的中间代谢物大部分是其磷酸酯;磷酸化和去磷酸化是众多活性蛋白,包括酶在内的共价修饰调节的重要方式。 ATP是体内能量的通用货币,所以,能量的释放、利用、转移、储存均以ATP为中心来实现。 乙酰CoA的硫酯键和ATP中的高能磷酸键 相似,水解时可释放出31.38KJ/mol的能量。 因此,乙酰CoA具有高的乙酰基转移势能。 一、概念:营养物在生物体内氧化成H2O和CO2,并释放出能量的过程称为生物氧化。
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