吸收波长和摩尔吸收系数.pptVIP

4 紫外可见光谱仪基本结构 (以UV2300为例) 波长范围：190～1100nm 上海天美 UV2300型紫外可见分光光度计 波长准确度：±0.3nm UV2300是一个双光束系统，是用一个半透半反镜将一束光分为参比光和样品光。从光源发出的白光经过单色器经过单色器，在此变成单色光。从单色器发出的光经环形反射镜 (M3)，而后被半反镜(M4)分成参比光束和样品光束。这两束光通过样品室被透镜聚焦，然后到达检测器 (D1和 D2) 并在此转换成电信号。 UV2300的光学系统 因光束几乎同时通过样品池和参比池，因此可消除光源不稳产生的误差。双光束分光光度计适用于在宽的光谱区域内扫描复杂的吸收光谱图，但对生物样品等复杂的试样不易找到合适的参比溶液。 光源发出的复合光通过单色器被分解成单色光，当单色光通过分光镜经过样品室、参比室时，一部分被样品吸收，其余未被吸收的光到达检测器，被转变为电信号，经电子电路的放大和数据处理后，通过显示系统给出测量结果。 紫外可见光谱仪主要部件 光源：分为可见光源和紫外光源。前者常用钨灯，适用波长范围是320—800nm；后者常用氘灯，适用波长范围是195—375nm。 单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。 棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同。 光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕。利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光。 吸收池：用于盛待测及参比溶液。 可见光区：光学玻璃池；紫外区：石英池。 检测器：作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。 现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。 信号显示系统：常用的信号显示装置有直读检流计，电位调节指零装置，以及自动记录和数字显示装置等。 分光光度计的校正和检验 当光度计使用一段时间后其波长和吸光度将出现漂移， 因此需要对其进行校正。 1.波长校正 使用镨-钕玻璃（可见光区）和钬玻璃（紫外光区）进行校正。因为二者均有其各自的特征吸收峰。 2.吸光度校正 可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L 硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，在规定的波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较。 3. 杂散光的检验可按下表所列的试剂和浓度，配制成水溶液，置1cm 石英吸收池中，在规定的波长处测定透光率，应符合表中的规定。 试剂 浓度/%（g/ml） 测定用波长/nm 透光率/% 碘化钠 1.00 220 ＜0.8 亚硝酸钠 5.00 340 ＜0.8 紫外可见吸收光谱的应用 物质的紫外吸收光谱基本上是其分子中生色团及助色团的特征，而不是整个分子的特征。如果物质组成的变化不影响生色团和助色团，就不会显著地影响其吸收光谱，如甲苯和乙苯具有相同的紫外吸收光谱。 另外，外界因素如溶剂的改变也会影响吸收光谱，在极性溶剂中某些化合物吸收光谱的精细结构会消失，成为一个宽带。所以，只根据紫外光谱是不能完全确定物质的分子结构，还必须与红外吸收光谱、核磁共振波谱、质谱以及其他化学、物理方法共同配合才能得出可靠的结论。（定性分析，定量分析） 定性分析 鉴定的方法有两种： （1）与标准物、标准谱图对照：将样品和标准物以同一溶剂配制相同浓度溶液，并在同一条件下测定，比较光谱是否一致。 （2）吸收波长和摩尔吸收系数：由于不同的化合物，如果具有相同的发色基团，也可能具有相同的紫外吸收波长，但是它们的摩尔吸收系数是有差别的。如果样品和标准物的吸收波长相同，摩尔吸收系数也相同，可以认为样品和标准物是同一物质。 定性分析：对照标准吸收图谱，若标准试样与未知物吸收光谱中峰的位置、数目和吸收强度完全一致，可初步确定为同一物质。 结构分析 利用紫外光谱可以推导有机化合物的分子骨架中是否含有共轭结构体系，如C＝C－C＝C、C＝C－C＝O、苯环等。利用紫外光谱鉴定有机化合物远不如利用红外光谱有效，因为很多化合物在紫外没有吸收或者只有微弱的吸收，并且紫外光谱一般比较简单，特征性不强。利用紫外光谱可以用来检验一些具有大的共轭体系或发色官能团的化合物，可以作为其他鉴定方法的补充。 结构分析：紫外-可见吸收光谱一般不用于化合物的结构分析，但利用紫外吸收光谱鉴定化合物中的共轭结构和芳环结构有一定价值。 如果一个化合物在紫外区是透明的，则说明分子中不存在共轭体系，不含有醛基、酮基或溴和碘。可能是脂肪族碳氢化合物、胺、腈、醇等不含双键或环状共轭体系的化合物。 如果在210～250nm有强吸收，表示有K吸收带，则可能含有两个双键的共轭体系，如共轭二烯或α，β-不饱和酮等。同样在260，