凝胶电泳应临用于糖蛋白的分离鉴定.pptVIP

二维电泳应用于糖蛋白的分离鉴定 目 录 糖蛋白（glycoprotein ） 膜蛋白中的糖 膜蛋白分子中的糖 糖蛋白的结构 糖基化 糖基化 是蛋白质翻译后修饰最重要的方式之 一，是必需的生理过程，对蛋白质生物学功能的 正确发挥起着至关重要的作用。 糖蛋白的形成是糖基化的一种表现形式 糖基化 糖蛋白 分离纯化及鉴定是糖蛋白研究的重要步骤 糖蛋白的分离纯化方法 电泳过程示意图 A为电泳前3层凝胶排列顺序，3层胶中均有快离子，慢离子 B显示电泳开始后，蛋白质样品夹在快、慢离子之间被浓缩成极窄的区带。 C显示蛋白质样品分离成数个区带。 凝胶电泳 二维电泳 双向凝胶电泳（二维电泳） 第一向采用等电聚焦 根据复杂的蛋白质成分中各个蛋白质的PI的不同，将蛋白质进行分离。 第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳 （SDS）就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。其结果不再是条带状，而是呈现为斑点状 。 二维电泳中糖蛋白的染色方法 基于PAS反应的染色方法 PAS--periodic acid-Schiff’s base method (高碘酸/过碘酸-席夫式碱方法) 原理 在过碘酸的作用下，糖蛋白中糖链上相邻两个碳原子上的羟基被氧化成醛基，醛基再与带有紫外或荧光基团的氨基形成席夫式碱，在紫外或荧光灯下检测即可。