细胞培养污染及排除.pptVIP

细胞培养（四） 暨 南 大 学 医 学 院 生物化学教研室 费 嘉 （一）培养细胞污染的判定与排除 污染的定义 ----按现代的观念，凡是混入培养环境中对细胞生存产生有害的成分和造成细胞不纯的异物都应该视为污染。 污染物的种类 微生物（真菌、细菌、病毒和支原体） 化学物质（影响细胞生存、非细胞所需的化学成分） 细胞（非同种的其他细胞） 污染途径 1 空气：空气是微生物及尘埃颗粒传播的主要途径。 ---- 培养设施不能设在通风场所。 ----- 无菌操作应在净化台内进行，工作时要带口罩，以免因讲话、咳嗽等使外界污染进入操作面，造成污染。 2 器材：各种培养器皿、器械消毒不彻底和洗刷不干净导致污染，另外需要对培养箱进行定期消毒，防止形成污染 3 操作： 实验操作无菌观念不强 技术不熟练 使用污染的器皿或封瓶不严 培养两种以上细胞时，操作不规范，交叉使用吸管或培养液、培养瓶等导致细胞交叉污染。 4 血清：有些血清在生产时就已经被支原体或病毒等污染。 5 组织样本：原代培养的污染多数来源于组织样本；取材时碘酒消毒后脱碘不彻底，可造成碘混入组织、细胞或培养液中，影响细胞细胞生长。 污染对培养细胞的影响及污染的检测 ----体外培养细胞自身没有抗污染能力 ----培养基中抗生素抗污染能力有限 培养细胞一旦发生污染多数将无法挽回。 细胞