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- 2018-12-22 发布于福建
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生物总来复习选修1专题4
解析:不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步地分离。 答案:C 走进实验室 基础再现 1.多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,它能以极少量的DNA为模板,在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。被广泛地应用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等各方面。 实验课题:多聚酶链式反应扩增DNA片段 2.PCR技术 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 引物 参与的组成 在DNA复制中的作用 解旋酶 打开DNA双链 DNA母链 提供DNA复制的模板 4种脱氧核苷酸 合成子链的原料 DNA聚合酶 催化合成DNA子链 (1)细胞内参与DNA复制的各种组成成分及其作用 ①解旋酶:打开DNA双链。 ②DNA母链:提供DNA复制的模板。 ③4种脱氧核苷酸:合成子链的原料。 ④DNA聚合酶:催化合成DNA子链。 ⑤引物:使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸(引物是一小段DNA或RNA,它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸)。 (2)DNA的合成方向 DNA的两条链是反向平行的,通常将DNA的羟基末端称为3′端,而磷酸基团的末端称为5′端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3′端延伸DNA链,因此,DNA复制需要引物。当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链,DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。 (3)在80~100 ℃的温度范围内,DNA的双螺旋结构将解体,双链分开,这个过程称为变性;当温度缓慢降低后,两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链。PCR利用了DNA的热变性原理,通过控制温度来控制双链的解聚与结合。 (3)在80~100 ℃的温度范围内,DNA的双螺旋结构将解体,双链分开,这个过程称为变性;当温度缓慢降低后,两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链。PCR利用了DNA的热变性原理,通过控制温度来控制双链的解聚与结合。 (4)TaqDNA聚合酶的应用,解决了高温导致DNA聚合酶失活的问题,促成了PCR技术的自动化;寻找目的菌株时,要根据它对生存环境的要求,到相应的环境中去寻找;实验室中微生物的筛选,是人为提供有利于目的菌株生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物的生长。 (5)PCR反应的条件:稳定的缓冲液环境、DNA模板、分别于两条模板链结合的两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶、能严格控制温度变化的温控设备。 (6)PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可以分为变性(95 ℃)、复性(55 ℃)和延伸(72 ℃)三步。从第二轮循环开始,上一次循环的产物也作为模板参与反应。DNA聚合酶只能特异性地复制处于两个引物之间的DNA序列,使这段固定长度的序列呈指数扩增。 高考总复习.生物 高考总复习.生物 选修1 生物技术实践 专题4 DNA和蛋白质技术 考纲内容及能力要求 考向定位 1.了解DNA的物理化学性质和DNA的溶解性 2.二苯胺法鉴定DNA的方法和原理 3.掌握PCR技术的基本原理 4.能够掌握PCR实验操作中的主要步骤 5.了解PCR实验中每个步骤所发生的变化 6.熟练进行实验操作,掌握实验方法 1.PCR的反应过程 2.DNA的合成方向 3.PCR反应所需的实验条件 4.PCR反应缓冲液的组成成分 5.TaqDNA聚合酶的应用 6.PCR实验中的具体操作步骤和实验操作中的注意事项 7.PCR产物检测的方法 基础梳理 DNA的粗提取与鉴定 基础梳理 1.提取DNA的方法 提取生物大分子的基本思路是选用一定的__________ 或__________方法,分离具有不同__________或__________的生物大分子。对于DNA的粗提取而言,就是要利用DNA与_________、_________和__________等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。 物理 化学 物理 化学性质 RNA 蛋白质 脂质 (1)DNA的溶解性DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中溶解度__________,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA_________,而使杂质沉淀;或者使杂质__________,DNA被析出,以达到分离目的。 (2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解__________,但是对__________没有影响。大多数蛋白质不能忍受60~80℃的高温,而DNA在__________以上才会变性。洗涤剂能够瓦解__________,但对DNA
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