植物激签素的测定方法.pptVIP

操 作 步 骤 包被---温育---洗涤---竞争---温育---洗涤---加二抗---温育---洗涤---显色---比色---计算 包 被 每小孔中加入100μl包被缓冲液，然后将酶标板放入内铺湿纱布的带盖瓷盘内。 37 ℃下1.5小时。 洗 板 将反应液甩干并在报纸上拍净。第一次加入洗涤液后要立即甩掉。然后再接着加第2次。共洗涤3次。 竞 争 即加标准物、待测样和抗体。 加标样及待测样： 取适量所给标样稀释配成： ABA标准曲线的最大浓度为100ng/ml,然后再依次2倍稀释8个浓度（包括2个0ng/ml，加入前两行的最后两排 ）。将系列标准样加入96孔酶标板的1、2、3行，每个浓度加3孔，每孔50μl,其余孔加待测样，每个样品重复3孔，每孔50μl。 加 抗 体 在微孔中加入一定量的抗体,混匀后每孔加50μl，然后将酶标板加入湿盒内开始竞争。 竞争条件37℃左右0.5h。 洗 板 将反应液甩干并在报纸上拍净。第一次加入洗涤液后要立即甩掉。然后再接着加第2次。共洗涤3次。 加“二抗” 将适当的酶标二抗，加入10ml样品稀释液中（比如稀释倍数1:1000就加10μl），混匀后，在酶标板每孔加100μl，然后将其放入湿盒内，置37℃下，温育0.5h。 洗 板 将反应液甩干并在报纸上拍净。第一次加入洗涤液后要立即甩掉。然后再接着加第2次。共洗涤3次。 加底