手性分析条件的建立和优化——手音性分析中的注意事项完美版.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * hi * */79 筛选结果示例　 　　　　　　　　 样品： */79 信息１: 判别具有分离可能性的色谱柱 */79 信息2: 色谱柱和洗脱顺序 AD-H vs OD-H、OJ-H的洗脱顺序相反 */79 信息3: 醇的种类对分离的影响 OD-H和OJ-H，用每种流动相均可分离。 AD-H，只有用乙醇才可分离。 */79 分析条件的选择 选择条件的要点 洗脱时间 峰形 对映体的洗脱顺序 */79 样品制备时??? 选择条件的要点 样品的溶解度 洗脱顺序 */79 若筛选没得到理想的分析条件时 选择最接近基线分离的条件 调整流动相中醇的比例 调整流速 调整温度 变更为同种类长度为25cm的色谱柱。 尝试其他的色谱柱 */79 应用组合筛选设备探索分析条件总结 使用具有广普分离能力的的4种手性色谱柱 使用适合高流速的15cm的手性色谱柱 组合应用2种醇，考察其分离情况 和旋光检测器并用，可一次性获得更多的判断信息 */79 内容提纲 1. 手性HPLC分析条件的建立和优化 2-1 正相色谱 2-2 反相色谱 2. 手性色谱柱的自动筛选 3. 手性分析中的注意事项 */79 Daicel大部分手性柱是涂敷型产品，在市场上具有着独特性。 若导入错误的溶剂，涂敷型柱子便会马上被破坏掉。 当导入错误的溶剂时，柱压会出现明显上升。 当用户出现柱压剧增或分离突然变差时，最常见的原因是错误地使用了溶剂。 一旦错误地使用了溶剂，重新恢复柱子性能的可能性很低。 若您遇到此类分析故障时，请对出厂报告重新确认柱子的性能或与大赛璐联系 最常见的使用故障=溶剂错误 */79 将手性柱接入液相色谱仪之前 1.用异丙醇将HPLC所有管路彻底清洗。 2.用流动相将HPLC所有管路彻底清洗。 所有溶剂入口 泵 泵与进样阀之间 定量环 进样阀清洗液 进样阀与柱子之间 柱子与检测器之间 检测器 使用前彻底清洗管路 */79 流动相或样品溶液过滤不彻底，固体颗粒堵塞管路或柱头，会引起柱压过高。 样品中成分在柱头析出或强烈吸附，会引起柱压升高。 流速过快，会引起柱压升高 每种柱子有特定的承压范围，请仔细参照相应的《色谱柱说明书》。 彻底过滤流动相及样品溶液。 样品预处理 使用保护柱 合理调节流速，特别在把柱子刚接上仪器的时候 原因： 后果： 长期超压会引起柱头塌陷，反压上升，柱效下降。 方法： 压力 */79 mg/L mg/L 流动相中水含量的影响 */79 mg/L 流动相中水含量的影响 */79 CHIRALCEL OJ 正己烷/乙醇＝90/10 1.0 ml/min，275 nm 10℃ 25℃ 40 ℃ 峰变形 (消旋化) */79 1 添加物残留效应 */79 残留物在普通流动相中可长时间地稳定保留 用醇洗涤可除去大部分的碱性添加剂 用酸洗涤也可除去碱性残留物 用碱洗涤可除去酸性残留物 建议使用专用的酸性条件和碱性条件的手性柱 在分析酸性和碱性样品时，勿忘使用添加剂 如何避免“残留效应” */79 * * * * * * * * * * * * * * */79 大赛璐（中国）手性事业部 手性分析中的注意事项 手性分析条件的建立和优化 */79 内容提纲 1. 手性HPLC分析条件的建立和优化 1-1 正相色谱 2-2 反相色谱 2. 手性色谱柱的自动筛选 3. 手性分析中的注意事项 */79 Daicel手性色谱柱一览表 正相 直链淀粉衍生物 CHIRALPAK? AD / AD-H CHIRALPAK? AS / AS-H 纤维素衍生物 CHIRALCEL? OD / OD-H CHIRALCEL? OJ / OJ -H CHIRALCEL? OA, OB, OC CHIRALCEL? OF, OG, OK CHIRALCEL? CA-1 反相 CHIRALPAK? AD -RH CHIRALPAK? AS -RH CHIRALCEL? OD-RH CHIRALCEL? OJ -RH 其它 CROWNPAK? CR (＋), (－) CHIRALPAK? OT(＋), OP (＋) CHIRALPAK? WH, MA (＋) CHIRALPAK ? QD-AX CHIRAL