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- 2018-12-24 发布于福建
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蛋白质对沉淀反应
题目:蛋白质沉淀反应 一、实验目的 掌握几种使蛋白质沉淀的方法; 掌握蛋白质可逆沉淀与不可逆沉淀的区别; 理解蛋白质变性和沉淀的关系。 二、原理 蛋白质是亲水胶体,正常状态下,蛋白质分子表面具有水化膜和电荷层,能保持其胶体溶液的稳定性,在一定因素 的影响下,蛋白质会失去电荷和脱水沉淀。 蛋白质的变性与沉淀之间没有必然联系 蛋白质沉淀反应 (一)蛋白质的盐析作用 (二)乙醇沉淀蛋白质 (三)重金属盐类沉淀蛋白质 (四)生物碱试剂沉淀蛋白质 (一)蛋白质的盐析作用 加盐类如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等可以破坏蛋白 质胶体周围的水膜,同时又中和了蛋白质分子的电 荷,因此使蛋白质产生沉淀,这种加盐使蛋白质沉 淀析出的现象称盐析。 盐溶现象为低盐浓度可使蛋白质的溶解度增加,实 验时要加足够量的盐。 蛋白质的盐析作用是可逆过程,用盐析方法沉淀蛋 白质时,较少引起蛋白质变性,经透析或用水稀释 时又可溶解。 (二)乙醇沉淀蛋白质 有机溶剂如酒精、丙酮等可使蛋白质产生沉淀,这 是由于这些有机溶剂和水有较强的作用,破坏了蛋 白质分子周围的水膜,因此发生沉淀作用。若及时 将蛋白质沉淀与丙酮或乙醇分离,蛋白质沉淀则可 重新溶解于水中。 (三)重金属盐类沉淀蛋白质 溶液pH在蛋白质等电点以上时,重金属盐类(如 Pb2+、Cu2+、Hg2+及Ag+等)易与蛋白质结合成不 溶性盐而沉淀。 重金属
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