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蛋白质在层析过程中的失活与复性 　　第55卷 第7期 化 工 学 报 Vol 55 7 2004年7月 Journal of Chemical Industry and Engineering (China) July 2004 　　综述与专论 　　蛋白质在层析过程中的失活与复性 　　李 明1 Jan ChristerJanson2 苏志国1 　　(1中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,北京100080; 　　2 　　Uppsala大学表面生物技术系,UppsalaSE 75123,瑞典) 　　摘 要 在层析分离过程中,层析的固相介质和溶液环境会引起蛋白质的结构变化:天然的蛋白质可能会降低活 　　性甚至完全失去活性,而结构变化了的蛋白质也可能重新折叠恢复活性.此类现象已经引起研究者特别是生化工程学家的关注,层析介质的种类和操作手段是影响此两个过程的关键因素.利用不同的层析方法,对不同的蛋白质采取相应的措施有利于提高活性蛋白质的回收率,具有重要的理论和应用价值.关键词 层析 蛋白质 变性 复性 　　中图分类号 Q503 文献标识码 A 　　文章编号 0438-1157(2004)07-1033-08 　　PROTEINDENATURATIONANDREFOLDINGDURING 　　CHROMATOGRAPHICPROCESSES 　　LIMing1,Jan ChristerJanson2andSUZhiguo1 　　(1NationalKeyLaboratoryofBiochemicalEngineering,InstituteofProcessEngineering, 　　ChineseAcademyofSciences,Beijing100080,China; 　　2 　　DepartmentofSurfaceBiotechnology,UppsalaBiomedicalCenter,UppsalaSE 75123,Sweden) 　　Abstract Theimpressingfromimmobilizedmediumandmovingsolutionmightcauseproteinconformationalchangeandaccompanyinglossofproteinactivityduringseparationbychromatographicprocesses Atthesametime,thedenaturedproteinmightrefoldtogaintheirnativestructureandtotalactivitywhentheypassthroughthechromatographiccolumnatsuitableoperationcondition Thisreviewfocusesonrecentadvancesincolumnseparationandrefolding,whichhaveshownpromisingresultsonactivityrecoveryfromnativeproteinandrefoldingyieldfrominclusionbodies Suitablechromatographicmediumandoptimizedoperationsystemwillaffectconformationalchangeandimprovetheyieldofactiveproteins,whicharevaluableonbothlaboratoryresearchandcommercialproductivity. 　　Keywords chromatography,protein,denaturation,refolding 　　足产品高纯度、高稳定性的要求.研究蛋白质在分离纯化过程中的结构变化对于提高目标蛋白质的收率、降低生产成本具有重要的实用价值. 　　在各种生物分离技术中,层析技术是最经常使用的方法,不同的生物大分子借助于适当的层析技术都可以获得纯度较高的产物.药用蛋白质,特别是注射用蛋白质的生产,至少包括两步以上的层析纯 　　Receiveddate:2004-02-04. 　　Correspondingauthor:Prof.SUZhiguo.E-mail:zgsu@home ipe ac cn 　　Foundationitem:supportedbytheNationalNaturalScienceFoun of 引 言 　　随着基因工程和蛋白质技术的发展,蛋白质的克隆与表达技术已经趋于成熟.然而,要完成某一基因工程蛋白质的生产,还要解