11第十一讲1都分子杂交.pptVIP

核酸分子杂交Nucleic Acid Hybridization 1 分子杂交概念及应用 分子杂交： 在分子克隆中的一类核酸和蛋白质分析方法，用于检测混合样品中特定核酸分子或蛋白质分子是否存在，以及其相对分子质量的大小。 分子杂交实质上是DNA或RNA单链之间退火形成DNA/RNA或DNA/DNA杂合分子。 应用范围： 重组子鉴别 基因分离 DNA片段分析 基因表达研究 。。。。。。 当用一个标记核酸分子与核酸样品杂交，便可以查明该样品中是否存在与该标记核酸分子具有同源性的分子。 2 探针的概念及其标记技术 2.1 探针(probe): 用于检测特定基因或转录产物存在或表达的DNA、RNA或寡核苷酸。 2.2 探针的标记技术 2.2.1 均匀标记 2.2.2 末端标记 2.2.1 均匀标记 ⑴ 切口平移法标记 ⑵ 随机引物标记 ⑶ PCR扩增标记 要求： [a-32P]dNTP 2.2.2 末端标记 ⑴ DNA片段的末端标记 Klenow酶