l-天冬酰胺酶四的生产工艺.pptVIP

天冬酰胺酶工艺流程图 大肠杆菌 → 肉汤菌种 → 种子 菌种 → 发酵液 → 菌体 → 提 取液 → 上清液 → 沉淀 → 洗脱液 → 洗脱液 → 冻干 → L-天冬酰胺酶 5 硫酸铵分级沉淀 取上述酶液，加入（NH4)2SO4至55%饱和度，调PH至7.0，室温搅拌1h，离心除去沉淀，取上清液加入（NH4)2SO4到90%饱和度，离心收集沉淀。 6 纯化 将沉淀用50mmol/L,PH7.0磷酸缓冲液溶解并透析，透析后的酶液，通过预先用10mmol/L，PH7.6磷酸缓冲液平衡的DEAE-纤维素层析柱（1cm×30cm）,用30mmol/L磷酸缓冲液洗脱，流速为40mL/h,收集天冬酰胺酶活性组分，再调整PH4.8,通过预先用50mmol/L,PH4.9的磷酸缓冲液平衡的CM-纤维素层析柱（1cm×8cm）,用50mmol/L,PH5.2的磷酸缓冲液洗脱，收集酶活性组分，冷冻干燥，即得L-天冬酰胺酶冻干粉，总收率为31%，比活为220U/mg蛋白。 刘培培 20092513418 L-天冬酰胺酶的生产工艺 LOGO （一）天冬酰胺酶的化学组成和性质 天冬酰胺酶是