蛋白质的等电点测定与沉行淀反应.pptVIP

实验7 蛋白质的等电点测定和沉淀反应 I. 蛋白质等电点测定 一、目的： 了解蛋白质的两性解离性质 学习测定蛋白质等电点的一种方法 二、原理： 蛋白质是两性电解质，在溶液中存在如下平衡： 蛋白质等电点：当蛋白质颗粒上正负电荷数目相等时溶液的pH值。 处于等电点时的蛋白质在电场中不发生移动；处于等电点时的蛋白质溶解度最低。 用醋酸与醋酸钠（醋酸钠混合在酪蛋白溶液中）配制成各种不同pH值的缓冲液。向缓冲液溶液中加入酪蛋白后，沉淀出现最多的缓冲液的pH值即为酪蛋白的等电点。 三、器材 1.水浴锅 2.温度计 3.200毫升锥型瓶 4.100毫升容量瓶 5.吸管 6.试管 7.试管架 8.乳钵 四.试剂: 1. 0.4%酪蛋白醋酸钠溶液 200毫升 2. 1.00mol/L醋酸溶液 100毫升 3. 0.10mol/L醋酸溶液 100毫升 4. 0.01mol/L醋酸溶液 50毫升 五.操作方法 取4支同样规格的试管，按下表顺序加入各试剂，然后混匀，静置10分钟，观察现象。 六.等电点测定实验结果 几号管最混浊,溶液pH为?由于等电点时蛋白质溶解度最小,所以酪蛋白