第一章 酶工程基础.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 两者的关系可用中间中间产物学说来解释。 * * * * * * * * * 基础：中间产物学说 * * * 三、酶活力的测定方法 终止法：在恒温系统中进行酶促反应，间隔一段时间后终止反应，然后测定反应物的消耗量或产物的生成量，从而计算出酶活性。终止反应的方法有加热、强酸、强碱、三氯乙酸、SDS、乙醇等。 连续反应法：不需要取样终止反应，而是基于反应过程光谱吸收、气体体积、酸碱度、温度等的变化，用仪器跟踪监测反应，记录结果，算出酶活力。 三、酶活力的测定方法 1.分光光度法：利用底物和产物在紫外或可见光部分的光吸收的不同，选择一适当的波长，测定反应过程中反应进行的情况。 优点：简便、节省时间和样品，可检测到nmol/L水平的变化。 2.荧光法：主要是根据底物或产物的荧光性质的差别来进行测定。 3.酶联测定法：许多酶促反应中，产物出现或底物的消失并不会引起光吸收的变化。在这种情况下要测定催化此反应的酶的活力，可将其与第二个具有特殊吸收光变化的酶反应相偶联。 酶与底物的中间产物学说 一、米氏方程 (米曼氏公式) S+E ES P+E 底物浓度与酶反应速度关系的数学表达式： 第五节 酶动力学和抑制作用 米氏常数 1、米氏常数Km ：当v=1