三七病程相关蛋白PR10-1基因克隆及功能初步分析-药学学报.PDF

药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 20 15, 50 (2): 227 232 ·227 · 七病程相关蛋白PR10-1 基因克隆及功能初步分析 1 2 1* 1 1 唐美琼 , 闵丹丹 , 李 刚 , 蒋 妮 , 叶云峰 (1. 广西 用植物园, 广西 用资源保护与遗传改良重点实验室, 广西 南宁 530023; 2. 广西中医药大学, 广西 南宁 530000) 摘要: 采用同源克隆法和RACE 技术相结合, 对三七根部蛋白质组差异进行研究, 鉴定PR 10-1 蛋白相应的 基因全长cDNA, 初步分析该基因在三七中的功能。测序结果显示该基因序列全长863 bp, 包含1个序列长465 bp 编码 155 个氨基酸的开放阅读框, 命名为PnPR10-1, GenBank 登录号KJ74 1402 。氨基酸序列同源 及系统发育 树分析发现, PnPR10-1 与人参的PR10-1 蛋白同源性最高, 含有 Bet-v-I 家族等多个保守结构域。实时荧光定量 PCR 分析显示, PnPR10-1 在 1～3 年生三七各组织中均有本底表达, 暗示其参与生长发育、代谢调控等生物学过 程; PnPR 10-1 在根部受根腐病原菌 (Fusarium oxyspo rum) 胁迫上调表达, 推测PnPR 10-1 基因可能参与抗三七根 腐病等广谱抗病防御反应。 关键词: 三七; 病程相关蛋白; 基因克隆; 表达模式; 防御反应 中图分类号: R93 1 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (20 15) 02-0227-06 Cloning and functional characterization of pathogenesis-related PR10-1 gene in Panax notoginseng 1 2 1* 1 1 TANG Mei-qiong , MIN Dan-dan , LI Gang , JIANG Ni , YE Yun-feng (1. Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plants, Guangxi Key Laboratory of Medicinal Resources Protection and Genetic Improvement, Nanning 530023, China; 2. Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530000, China ) Abstract : With homology cloning approaches coupling with RACE (rapid-amplification of cDNA ends) techniques, the f