生化实验课件酶切实验7年制.pptxVIP

原 理限制性内切酶是一类具有严格识别位点，并在识别位点内或者附近切割双链DNA的脱氧核糖核酸酶。GGATCCCCTAGGGTCGACCAGCTGGCCTAGGATCC GGTCCAGGACCTGHindⅡBamHⅠ++平端切口粘端切口Xba I: TCTAGA AGATCTSal I: GTCGAC CAGCTG实验步骤10×Cutsmart Buffer 2 ?l质粒DNA 1 ?lXba Ⅰ 1 ?lSal Ⅰ 1 ?lH2O 15 ?l 20 ?l37℃水浴酶切2小时。1% 琼脂糖凝胶电泳鉴定。NE buffer (pH 7.9)150 mM NaCl10 mM Tris-HCl10 mM MgCl21 mM DTT二硫苏糖醇基因组DNA加样TE溶解液10ul6 x loading buffer 2ulDNA染料1ul质粒酶切体系加样酶切体系20ul6 x loading buffer 4ul