《分子生物学检验技术课件》核酸基本结构和功能.pptVIP

第二讲 核酸的基本结构和功能  1868年，F. Miescher从细胞核中分离得到一种酸性物质，现在被称为核酸。 核酸是一类重要的生物大分子，担负着生命信息的储存与传递。 核酸是现代生物化学、分子生物学的重要研究领域，是基因工程操作的核心分子。 1944年，Avery的转换转化实验 1952年， 噬菌体感染大肠杆菌试验。 以上两个试验证明了DNA是遗传物质，物种的所有特征都编码在DNA分子中。 以后又发现了RNA病毒，它们的遗传信息编码在RNA分子中。 有人说：给我一个爱因斯坦的细胞，我就可以克隆出许许多多的爱因斯坦。--一个细胞中含有这种生物所有的遗传信息。 三、核酸在哪里？ 98％核中（染色体中） 真核 线粒体（mtDNA） 核外 叶绿体（ctDNA） DNA 拟核 原核 核外：质粒（plasmid） 病毒：DNA病毒 RNA有3种，主要存在于细胞质中 四、核酸的基本化学组成 1. 戊糖（五碳糖---甲乙丙丁戊己庚辛） 六、核苷和磷酸怎样连接成核苷酸？ 核苷酸 核苷+磷酸  戊糖+碱基+磷酸 继续磷酸化 环化磷酸化 肌苷酸及鸟苷酸(强力味精) 七、核苷酸与核苷酸怎样连接成核酸？ 上一个核苷酸的C3’-OH 与下一个核苷酸的5’-磷酸基形成3’,5’-磷酸二酯键 上一个核苷酸的C3’-OH 与下一个核苷酸的5’-磷酸基形成3’,5’-磷酸二酯键 第三节 DNA的结构 一、DNA的一级结构 脱氧核糖核酸的排列顺序 可以用碱基排列顺序表示 连接键：3’，5’-磷酸二酯键 磷酸与戊糖顺序相连形成主链骨架 碱基形成侧链 多核苷酸链均有5’-末端和3’-末端 DNA的碱基顺序本身就是遗传信息存储的分子形式。生物界物种的多样性即寓于DNA分子中四种核苷酸千变万化的不同排列组合之中。 二、DNA的三级结构 DNA双螺旋的进一步扭曲构成三级结构，负超螺旋 原核 双链环状DNA（dcDNA） 病毒 单链环状DNA（scDNA） 单链线性DNA（ssDNA） 三、核酸的变性、复性与分子杂交 1. 变性 稳定核酸双螺旋次级键断裂，空间结构破坏，变成单链结构的过程。核酸的的一级结构(碱基顺序)保持不变。 变性表征 生物活性部分丧失、粘度下降、浮力密度升高、紫外吸收增加（增色效应） 变性因素 pH（11.3或5.0） 变性剂（脲、甲酰胺、甲醛） 低离子强度 加热 本 章 小 结 核酸是遗传物质载体的证明和研究历史 核酸的化学结构：戊糖、碱基（A、T、G、C、U），核苷、核苷酸及其衍生物的结构特点（原子编号） DNA的结构：一级结构（核酸序列及其表示、基因及基因组、序列测定）、二级结构（ Watson －Crick双螺旋模型、Z－DNA）、结构维持的化学键 RNA结构与功能：碱基组成特点、RNA的种类结构及功能 核酸的性质：酸碱性、变性与复性、分子杂交 双螺旋DNA的结构参数 20o 0o 7o 0.255 0.34 0.27 11 10 12 2.8 3.4 4.5 2.0 2.3 1.8 右 右 左 A－DNA B－DNA Z－DNA 碱基对与水平面倾角 碱基对间垂直距离（nm） 每转碱基对数目 螺距（nm） 螺旋直径（nm） 旋转方向 类型 双螺旋稳定的力 氢键 碱基堆积力（疏水相互作用及范德华力） 离子键等 则DNA变性剂（热、pH、脲/酰胺、有机溶剂） DNA的存在形式 真核 双链线性DNA（dsDNA） 第四节 RNA的结构与功能 一、RNA的结构特点 碱基: A、G、C、U （A＝U/G≡C） 多为单链，分子较小 分三类：⑴mRNA –信使RNA，蛋白质翻译的模板⑵ tRNA---蛋白质翻译时转运氨基酸的工具（15%） ⑶rRNA ---构成蛋白质合成的场所（80%） 少数病毒是RNA病毒（基因由RNA编码） 二、RNA的功能：总体上，DNA编码遗传信息；RNA将其兑现。 tRNA的三级结构—三叶草形，重要功能区：⒈反密码环 ⒉氨基酸臂 第五节 核酸的性质 一、一般的理化性质 两性解离 / 一般呈酸性（在中性溶液中带负电荷），微 溶于水，不溶