基因工程1p时pt课件.ppt

基因的基本功能是什么？ 携带并传递遗传信息 表达遗传信息 定向基因改造设想 基因工程是狭义的遗传工程， 但广义的遗传工程泛指把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。 基因工程的核心是构建重组DNA分子，因此，早期也将基因工程称为重组DNA技术。 一、工具酶——限制性核酸内切酶 早在1970年，从细菌中分离得到。1994年分离到2300多种，常用200多种，主要从微生物分离。 功能：能够特异性地识别DNA上一小段特殊的核苷酸序列，并且只能在这段序列的特定切点上切割此DNA分子。 （具有特异性） —G AATTC— —CTTAA G— —A AGCTT— —TTCGA A— 限制性核酸内切酶 连接的部位 磷酸二酯键 结果 两个DNA相同的粘性末端连接起来。 DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？ 相同点： 两者都是形成磷酸二酯键。 不同点： DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条DNA链； DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。 作用 将外源基因送入受体细胞。 常用的 质粒 噬菌体 动植物病毒等 三、基因操作的基本步骤 1、获得目的基因 目的基因在宿主细胞中表达，产生人们需要的功能物质 小 结 * * 设想一 能否让细菌“吐出”蚕丝？ 设想二 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 什么是基因工程 实质 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 重组DNA技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 基因工程的概念 1、为什么细菌的基因可以导入植物细胞内？ 2、为什么细菌的基因可以在植物细胞内表达？ 基因工程实现的基础： （1）共同的分子组成和规则双螺旋结构是基因工程的物质基础； （2）不同生物共用一套密码子是理论基础； （3）一系列工具的发现为基因工程提供了技术基础。 苏云金芽孢杆菌 (有抗虫特性) 普通棉花(无抗虫特性) 抗虫基因 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 切割 1、基因的剪刀—— 2、基因的针线—— 3、基因的载体—— 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 质粒 基因操作的工具 重播 A P C P G P T P A P C P G P T P 限制酶切割的是哪个部位的键? 磷酸二酯键 要想获得DNA上决定某个特定性状的基因，必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的(互补）粘性末端 两个切口，四个粘性末端。 基因的针线：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制性核酸酶切割 重组DNA 二、工具酶——DNA连接酶 基因操作的工具 载体 质粒是能够自主复制的双链环状DNA分子，它们在细菌中以独立于染色体之外的方式存在，是一种特殊的遗传物质。 质粒分子结构示意图 返回 基因工程的操作工具——载体 1、要能与所选的基因（目的基因）连接。 具有相同的限制性核酸内切酶切点。 2、要能侵入宿主细胞，并且能在宿主细胞中复制并稳定的保存。质粒的存在对宿主细胞无影响， ？ 3、要具有标记基因 （抗生素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等） ？ 能充当载体： 质粒、噬菌体和动植物病毒 以便能进行筛选（用以检测目的基因有没有导入）。 载体必须同时满足的要求：　 思考： 如何让目的基因与载体（质粒）连接起来？ 质粒 DNA分子 同一种限制性核酸内切酶处理 一个切口 两个粘性末端 两个切口 的目的基因 重组DNA分子（重组质粒） DNA连接酶 基因操作的工具： 1、基因的剪刀——限制