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实验十一 水中细菌总数的测定 一、实验目的 1.学习水样的采取方法和水样细菌总数测定的方法。 2.了解水源水的平板菌落计数的原理。 二、实验原理 本实验应用平板计数技术测定水中细菌总数。由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖，因此，以一定的培养基平板上生长出来的菌落，计算出来的水中细菌总数仅是一种近似值。目前一般是采用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。 三、试剂与器材 1.试剂： 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，灭菌水。 2.器材： 灭菌三角瓶，灭菌的带玻璃塞瓶，灭菌培养皿，灭菌吸管，灭菌试管等。 四、实验内容 1.水样的采取 自来水：自来水龙头灼烧3分钟，放开水龙头流5分钟后接取水样。 桶装水:待水流一段时间后接取水样。 湖水:取距水面10-15厘米出水样。 2 细菌总数测定 （1）自来水和桶装水 取1毫升注入无菌培养皿中做两皿； 倒入15毫升45的左右的牛肉膏蛋白胨培养基后混合均匀； 另取一空白培养皿做成空白对照； 培养基凝固后倒置于37的恒温培养箱中培养24-48小时后计数。 （2）湖水或池水 稀释水样:4.5毫升无菌水+0.5毫升水样做梯度稀释至10-3； 取最后三个稀释度的水样1毫升注入2个无菌培养皿，然后倒入15毫升45的牛肉膏蛋白胨培养基混合均匀； 37恒温培养24-48小时后计数。 3 菌落计数方法 菌苔不计数； 首先选取菌落数在30-300之间稀释度计数，平均菌落数乘于稀释倍数即可； 若有两个稀释度的平均菌落数均在30-300之间，按两者比值决定：如小于2，取两者平均数；如大于2，取其中菌落较小者； 如都大于300，取稀释度较高的平均菌落乘于稀释倍数； 如都小于30，取稀释度最小的平均菌落乘于稀释倍数； 如都不在30-300之间，取最接近300或30的平均菌落乘于稀释倍数。 五 实验报告 1 结果 P183 2 思考题 P184（3） * *
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