细胞生物对学第12章.pptVIP

第十二章 细胞增殖及其调控 细胞增殖是生物繁育的基础 细胞增殖受到严密的调控机制所监控。 细胞增殖是生命的基本特征，种族繁衍、个体发育、机体修复等都离不开细胞增殖。 初生婴儿有1012个细胞，成人1014个，约200种类型。 成人体内每秒钟有数百万新细胞产生，以补偿衰老和死亡的细胞。 一个大肠杆菌若按20分钟分裂一次，并保持这一速度，则两天即可超过地球的重量。 细胞增殖（cell proliferation）包括细胞分裂及其物质准备两个连续进行的过程。 细胞增殖调控是整个生命活动的最基本特征。 任何细胞，其增殖过程都必须遵守一定的规律。 在高等生物中，细胞增殖调控更为复杂，不仅要遵循细胞自身的增殖调控规律，还有遵守生物体整体调控机制的调节。否则，不受约束而生成的细胞将被机体免疫系统清除，或者癌变，威胁整个生命。 第一节 细胞周期概述 从一次细胞分裂结束开始，到下一次细胞分裂结束为止，称为一个细胞周期。 细胞周期包括物质积累和细胞分裂的循环过程。 1.1 细胞周期 细胞周期的分期 有丝分裂期（mitosis）； 分裂间期（interphase）：G1、S、G2； 细胞增殖状况 周期中细胞（cycling cell）； G0期细胞，或静止期细胞（quiescent cell）； 终末分化细胞； 1.2 细胞周期中各个不同时期及其主要事件 G1期 物质合成 起始点、限制点、检验点： 细胞内存在的一系列监控机制，可以鉴别细胞周期进程中的错误，并诱导产生特异的抑制因子，阻止细胞周期进一步运行。 S期主要事件 DNA合成 复制受到多种细胞周期调节因素的严密调控，同时与细胞核结构如核骨架、核纤层、核膜等关系密切。 复制表现出严格的有序性：常染色质先复制，异染色质后复制；富含GC的序列先复制，富含AT的序列后复制。 真核细胞新合成的DNA立即与组蛋白结合，共同组成核小体结构。 新的组蛋白合成、中心粒的复制也是发生在S期。 G2期、M期主要事件 各种物质和细胞结构为细胞进入M期作准备； G2期检验点：要检查DNA是否完成复制，细胞是否已生长到合适大小，环境因素是否利于细胞分裂等。 只有当所有有利于细胞分裂的因素得到满足后，细胞才能顺利实现从G2到M期的转化。 M期 分裂期 1.3 细胞周期长短测定 脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法 适用范围：细胞种类简单；周期时间较短；周期运转均匀； 原理：短暂标记后，当时处于S期的全部细胞均被标记；以后陆续进入M期。 细胞周期长短测定 流式细胞分选仪测定法 通过监测细胞DNA含量在不同时间内的变化，从而确定细胞周期时间长短； 原理因为G1期和G2/M期细胞含有固定的DNA含量，分别为1C和2C，而S期细胞的DNA含量介于1C和2C之间。 通过直接标记DNA复制，通过统计细胞数量和被标记的分裂期细胞百分比，对细胞周期进行综合分析。 1.4 细胞周期同步化 应用某些药物处理，将细胞抑制在细胞周期中的某个特定时期，然后，将细胞从抑制中释放出来，所有细胞将会同步运转。 自然同步化 人工选择同步化 人工诱导同步化 人工选择同步化 人为地将处于不同时期的细胞分离开来，从而获得不同时期的细胞群体。 处于对数生长期的单层培养细胞，分裂期的细胞收集，离心，将其培养，细胞即开始同步分裂，并进行细胞周期运转，即可得到不同时相的细胞。 缺点：效率低，成本高； 密度梯度离心法：某些细胞如裂殖酵母，不同时期的细胞在体积和重量上差别显著，可以采用密度梯度离心方法分离出处于不同时期的细胞。 缺点：适用范围十分有限； 人工诱导同步化 通过药物诱导，使细胞同步化在细胞周期中某个特定时期。 DNA合成阻断法 DNA合成抑制剂：TdR；羟基脲（HU）； 方法：将一定剂量的抑制剂加入培养液并继续培养一定时间（TG2＋TM ＋TG1），所有细胞即被抑制在S期； 分裂中期阻断法 药物：秋水仙素、秋水仙胺、nocodazole； 将细胞阻断在细胞分裂的中期，处于间期的细胞，受药物的影响相对较弱，常可以继续运转到分裂期。 条件依赖性突变株在细胞周期同步化中的应用 将突变株转移到限定条件下培养，所有细胞便同步化在细胞周期中某一特定时期。 第二节 细胞分裂 2 . 1 有丝分裂 1.2.1 有丝分裂过程 前期(prophase)； 前中期(premetaphase)； 中期(metaphase)； 后期(anaphase)； 末期(telophase)。 （五）末期 从子染色体到达两极，至形成两个新细胞为止的时期。涉及子核的形成和胞质分裂两个方面。 胞质分裂 胞质分裂（cytokinesis）开始于分裂后期，完成于分裂末期； 分裂沟 中间体：分裂沟下方由微管、小泡膜聚集构成的一个