姜黄素对大鼠视网膜缺血／再灌注损伤时内质网应激的影响-世界中医药.PDFVIP

世界中医药　２０１８年４月第１３卷第４期 ·９２９· 姜黄素对大鼠视网膜缺血／再灌注损伤时 内质网应激的影响 彭栋梁　王晓娜　杨　军 （河南中医药大学第三附属医院麻醉科，郑州，４５０００３） 摘要　目的：探讨姜黄素对大鼠视网膜缺血／再灌注损伤（ＲＩＲＩ）时内质网应激（ＥＲＳ）的影响。方法：选取清洁级Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）雄性大鼠９６只，采用随机数字表法分为３组（ｎ＝３２）：对照组（Ｃ组）、缺血／再灌注组（Ｉ／Ｒ组）和姜黄素组 （ＣＵＲ组）。Ｉ／Ｒ组和ＣＵＲ组采用前房灌注法使眼内压升高而制备大鼠ＲＩＲＩ模型，缺血６０ｍｉｎ，再灌注２４ｈ后结束实验。 于缺血前６０ｍｉｎ时，ＣＵＲ组腹腔注射姜黄素１００ｍｇ／ｋｇ，Ｃ组和Ｉ／Ｒ组腹腔注射等容量生理盐水。各组于再灌注２４ｈ时 处死８只大鼠，取视网膜组织，光镜下观察病理学改变；采用ＴＵＮＥＬ法检测视网膜组织细胞凋亡情况并计算凋亡指数 （ＡＩ）。３组于再灌注２４ｈ时处死８只大鼠，取视网膜组织，电镜下观察大鼠视网膜组织超微结构改变。３组于再灌注２４ ｈ时处死８只大鼠，取视网膜组织，逆转录聚合酶链式反应（ＲＴＰＣＲ）检测大鼠视网膜组织中ＣＣＡＡＴ增强子结合蛋白 （Ｃ／ＥＢＰ）同源蛋白（ＣＨＯＰ）、活化的转录因子４（ＡＴＦ４）和Ｘ盒结合蛋白１（ＸＢＰ１）ｍＲＮＡ表达。３组于再灌注２４ｈ时处死 ８只大鼠，取视网膜组织，蛋白免疫印迹法（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ）检测大鼠视网膜组织中、Ｂ淋巴细胞瘤２基因（Ｂｃｌ２）、Ｂｃｌ２相关 Ｘ蛋白（Ｂａｘ）及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶３（ｃａｓｐａｓｅ３）的蛋白表达，计算Ｂｃｌ２／Ｂａｘ比值。结果：与Ｃ组比较，Ｉ／ Ｒ组大鼠视网膜组织ＸＢＰ１、ＡＴＦ４和 ＣＨＯＰｍＲＮＡ表达明显上调（Ｐ＜００５）；与 Ｉ／Ｒ组比较，ＣＵＲ组大鼠视网膜组织 ＸＢＰ１、ＡＴＦ４和ＣＨＯＰｍＲＮＡ表达明显下调（Ｐ＜００５）。与Ｃ组比较，Ｉ／Ｒ组大鼠视网膜组织ＣＨＯＰ、Ｂａｘ和ｃａｓｐａｓｅ３蛋白 表达升高，Ｂｃｌ２蛋白表达及Ｂｃｌ２／Ｂａｘ比值均下降，与Ｃ组比较，差异均有统计学意义（Ｐ＜００５），ＣＵＲ组大鼠视网膜组 织ＣＨＯＰ、Ｂａｘ和ｃａｓｐａｓｅ３蛋白表达下降，Ｂｃｌ２蛋白表达及 Ｂｃｌ２／Ｂａｘ比值均升高，与 Ｉ／Ｒ组比较，差异均有统计学意义 （Ｐ＜００５）。与Ｃ组比较，Ｉ／Ｒ组大鼠视网膜组织出现形态结构及超微结构损伤，ＡＩ值升高（Ｐ＜００５）。与Ｉ／Ｒ组比较， ＣＵＲ组大鼠视网膜组织形态结构及超微结构损伤均减轻，ＡＩ值降低（Ｐ＜００５）。结论：姜黄素可减轻大鼠ＲＩＲＩ，其机制 可能与抑制ＥＲＳ介导的细胞凋亡有关。 关键词　姜黄素；ＣＣＡＡＴ增强子结合蛋白同源蛋白；活化的转录因子４；Ｘ盒结合蛋白１（ＸＢＰ１）；内质网应激；细胞凋亡； 再灌注损伤；视网膜 ＥｆｆｅｃｔｏｆＣｕｒｃｕｍｉｎｏｎＥｎｄｏｐｌａｓｍｉｃＲｅｔｉｃｕｌｕｍＳｔｒｅｓｓｄｕｒｉｎｇＲｅｔｉｎａｌＩｓｃｈｅｍｉａ／ＲｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎＩｎｊｕｒｙｉｎＲａｔｓ ＰｅｎｇＤｏｎｇｌｉａｎｇ，ＷａｎｇＸｉａｏｎａ，ＹａｎｇＪｕｎ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＡｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＴｈｉｒｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＨｅｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００３，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｃｕｒｃｕｍｉｎｏｎｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃｒｅｔｉｃｕｌｕｍｓｔｒｅｓｓ（ＥＲＳ）ｒｅｔｉｎａｌｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ（ＲＩＲＩ）ｉｎｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ａｔｏｔａｌｏｆ９６ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ（ＳＤ）ｍａｌｅｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｃ ｇｒｏｕｐ），ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｇｒｏｕｐ（Ｉ／Ｒｇｒｏｕｐ）ａｎｄｃｕｒｃｕｍｉｎｇｒｏｕｐ（ＣＵＲｇｒｏｕｐ