血清总胆红素和结分合胆红素的测定.pptVIP

血清总胆红素和结合胆红素的测定 董雷鸣 一、概述 1、胆红素的代谢 2、结合胆红素和未结合胆红素的概念 结合胆红素和未结合胆红素的概念 二、实验: 改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素 原理 试剂 咖啡因-苯甲酸钠试剂 碱性酒石酸钠溶液 对氨基苯磺酸溶液 重氮试剂 叠氮钠溶液 胆红素标准液(100μmol/L) 操作 样品的测定 校正曲线的制作 参考值 血清总胆红素 5.1~19μmol/L 血清结合胆红素 1.7~6.8μmol/L 临床意义 总胆红素 ——反映黄疸的程度 结合胆红素 ——鉴别黄疸的类型 注意事项 标准和标本应尽量避光 ——胆红素对光敏感 避免严重溶血 ——血红蛋白可与重氮试剂反应,产物可破坏偶氮胆红素 取空腹血 ——血脂对测定有一定的干扰 T h a n k s * * 胆红素的代谢 1 4 经过肝脏处理,与葡萄糖醛酸(少量与硫酸)结合后的胆红素 未经肝脏处理的胆红素 间接胆红素 直接胆红素 重氮试剂 血清总胆红素和结合胆红素的测定 方法 重氮反应法 胆红素氧化酶法 直接分光光度法 非结合胆红素 结合胆红素 总胆红素 重氮试剂 咖啡因-苯甲酸钠 偶氮胆红素 碱性酒石酸钠 偶氮胆红素 1.2 1.2 1.2 碱性酒石酸 -- 1.55 -- 咖啡因-苯甲酸钠 -- 0.05 -- 叠氮钠 37℃水浴10min -- 0.4 0.4 重氮试剂 0.4 -- -- 对氨基苯磺酸 1.6 -- 1.6 咖啡因-苯甲酸钠 0.2 0.2 0.2 血清 对照管 结合胆红素管 总胆红素管 加入物(ml) 样品的测定 充分混匀，波长600nm，对照管调零。 0 0.2 -- 0 20 0.4 0.1 1 40 0.3 0.2 2 管 100 80 60 相当于胆红素浓度 -- 0.1 0.2 同一稀释用血清 0.2 0.4 0.3 胆红素标准贮存液 (100μmol/L) 5 4 3 号 加入物(ml) 校正曲线的制作 充分混匀，按总胆红素测定法操作。用0号管调零。 *