肾上腺受体的分子点药理学.ppt

肾上腺受体的分子药理学? 第一节 肾上腺素受体的分型 表1-1 α1-AR，α2-AR与β-AR的药理与信号传导系统特征 α1-AR的亚型 Morrow与Greese于1986年用3H-哌唑嗪作为放射性配体显示拮抗剂WB4101及酚妥拉明与大鼠脑皮层中的α1-AR有高、低亲和性两种结合位点，假设它们为α1-AR的2种亚型，并分别称之为α1A与α1B亚型。 此后很快得到全面证实 α1A与α1B亚型受体的药理特性及信号传导系统的主要差别 与氯乙基可乐定(CEC)的反应：仅α1B-AR与CEC发生烷化反应从而被不可逆阻断 与选择性拮抗剂及激动剂的亲和性：与多数拮抗剂如WB4l01、酚妥拉明等及激动剂甲氧明、部分激动剂羟甲唑啉等的亲和性α1A-AR显著高于α1B-AR，仅对拮抗剂Spiperone的亲和性为α1B-AR高于α1A-AR 信号传导机制：α1A-AR激动后引起的生物学效应依赖于细胞外Ca2+的存在，而α1B-AR不依赖。2种亚型受体激动时生成磷酸肌醇的种类、生成途径与时相等都有明显差别。 关于α1c-AR亚型 1990年Schwinn等从牛脑得到一种新的α1-AR cDNA克隆，其中跨膜部位氨基酸序列有72％与α1B-AR相同。 在COS7细胞表达后检查这种受体的药理特性，发现它与WB4101、酚妥拉明等的亲和性显著高于α1B-AR，而与α1A-AR相近，但却又能被CEC不可逆性阻断，因而既不同于α1A-AR，又不同于α1B-AR，他们称这种受体为α1C亚型。 关于α1c-AR亚型(con’t) Faure等、Rokosh等、price等、Perez等陆续采用更为精确的RNase保护分析方法显示大鼠α1C克隆受体在大鼠组织中的分布与α1A亚型相同。 Ford等与Blue等还显示大鼠α1C克隆受体的药理特性与α1A亚型相似。 因此，国际药理联合会受体命名与药物分类委员会决定取消α1C而将原来的改为α1A α1D亚型 的发现 1991年 Perez等从大鼠脑海马回中克隆到一种α1-AR cDNA，它的碱基对序列与Lomasney报道的克隆只差2个碱基对 在COS7细胞表达后的药理学特性检查，发现它与WB4101及5-MU的亲和性虽略高于α1B-AR，但又显著低于α1A-AR 对(+)niguldipine的亲和性甚至比α1B亚型还低，而且可部分被CEC不可逆阻断。因而他们认为这是第四种α1-AR亚型，称之为α1D。 表1-2 α1-AR三种亚型的主要区别 α2-AR的亚型 根据对选择性拮抗剂的亲和性及组织分布特异性，可将α2-AR分成α2A、α2B与α2C 3种亚型 见表1-3 α2-AR各种亚型的药理学特性 采用分子生物学技术的分型 最先分别从人血小板、基因库与肾脏克隆到3种α2-AR，其基因分别位于第10、第2与第4对染色体上，故称作α2-C10、α2-C2与α2-C4亚型 α2-C10的药理特性及分布与α2A完全相符。关于α2-C2、α2-C10与α2B、α2C间的关系尚未完全定论，但多数意见认为α2-C2与α2B对应，α2-C4与α2C对应。 β-AR的亚型 60年代中后期已确定β-AR包含β1与β2亚型， 与内源性激动剂的亲和性：β1-AR为EPi≤NE，而在β2-AR则EpiNE 随后不久也发现脂肪组织中部分β-AR的药理特性与βl-AR、β2-AR均不相同 β-AR的亚型（con’t） 1989年Emorine等采用火鸡β1-AR与人β2-AR基因的完整编码区筛选人基因文库，得到一种既不同于β1-AR，又不同于β2-AR的克隆基因 其编码402个氨基酸，序列与人β1-AR及β2-AR分别仅有50.7％和45.5％相同(人β1-AR与β2-AR之间有48.9％相同)，称之为β3-AR。 β3-AR与βl-AR、β2-AR的药理特性 将人β3-AR基因与人βl-AR、人β3-AR cDNA分别在CHO细胞表达后，观察与比较这三种β-AR亚型的药理特性发现β3-AR与βl-AR、β2-AR显著不同，而与以前报道的非典型β-AR基本一致(见表1-4) 第二节 肾上腺素受体结构与功能的关系 AR分子的基本结构 AR分子由429-561个氨基酸残基组成，有7个区域，为连续20-28个疏水氨基酸组成，形成7个跨膜片段 构成3个细胞外环与3个细胞内环，受体分子的氨基端在胞外，羧基端在胞内。 AR结构示意图 研究AR结构与功能的方法 ①删除(deletion)法：即有目的地去除一段基因DNA，使表达的受体缺少一段氨基酸序列； ②点突变(site mutation)法：即有目的地改变基因DNA中的碱基对序列由别的氨基酸来代替； ③嵌合(Chimeric)法：即在两种亚型AR间交换某一