检验项目标准操作规程-HIV-AbAg.docxVIP

检验项目人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合检测标准操作规程 页码 PAGE 5 / NUMPAGES 5 检验项目标准操作规程 LIAISON 人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合检测 （HIV Ab/Ag） (化学发光法，CLIA) 类别 信息 用途 本产品用于体外定性检测人血清或血浆中的人类免疫缺陷病毒1 型（HIV-1）的P24 抗原，以及两种人类免疫缺陷病毒1 型（M 群和O 群）和/或人类免疫缺陷病毒2 型（HIV-2）特异性抗体。 此试剂仅用于全自动化学发光免疫分析仪（LIAISON?XL）系列。 临床意义 获得性免疫缺陷综合症（艾滋病）的发病原因已被确定为两种类型的逆转录病毒，统称指定为人类免疫缺陷病毒（HIV）。HIV是由HIV感染者之间的性接触、接触到受污染的血液或者血液制品进行传播的，以及受感染的母亲传染给胎儿或围产期感染给新生儿。艾滋病患者和HIV感染的无症状个体中可以检测到HIV抗体；通过细胞培养或者病毒RNA和/或前病毒DNA的扩增后在艾滋病患者和阳性个体中能检测到HIV病毒感染。 通过系统进化分析HIV-1可以分成M群（主要的或较多的），N群（新的，非-M群，非-O群），O群（外部的）和P群（Plantier 等，Nat. MED. 2009年）。全球艾滋病的流行主要是由M群的病毒引起的，而N群和O群病毒相对少见，而且是非洲西中部特有的。然而，已经确定在欧洲和美国存在O群感染。 HIV-1 M群由遗传亚型（A，B，C，D，F，G，H，J和K）组成，而且是循环重组的形式（CRFs）。 HIV-1 B亚型是在美国，欧洲，日本和澳大利亚的主要亚型，但在欧洲新的HIV-1病毒感染的很大比例是由非B亚型引起的。 与之密切相关但不同类型的免疫缺陷病毒是人类免疫缺陷病毒2型（HIV-2）。人类免疫缺陷病毒2型与HIV-1在形态结构，基因组组织，细胞嗜性、体外致细胞病变性，传播途径，以及导致艾滋病的能力方面都是类似的。 HIV-2比HIV-1致病性弱些，相比HIV-1而言，HIV-2从感染到全面爆发有一个较长的潜伏期，疾病进展慢，病毒滴度较低，垂直和水平传播概率低。 HIV-2的西非流行，但在美国，欧洲，亚洲，非洲等地区感染HIV-2的频率比HIV-1低。 HIV-1和HIV-2之间的血清学交叉反应已经显示出不同样本的高度可变性。这种变异需要HIV-1和HIV-2两种病毒的抗原来筛选HIV-1和HIV-2的抗体。 HIV-1和/或HIV-2抗体和/或p24抗原在血液中的存在表明潜在感染HIV-1和/或HIV-2。HIV感染后的早期，但在转阴之前，在血清或血浆标本中可检测HIV抗原。最经常作为抗原血症标记使用的HIV结构性蛋白是一种核心蛋白， P24。人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合检测试剂盒（化学发光法）使用HIV P24单克隆抗体检测转阴之前的HIV p24抗原，从而降低转阴窗口期并提高HIV感染的早期检测。 样本信息 样本类型 样本管/抗凝剂 最小样本量 血清 200 μL 标本+ 150 μL 死体积 血浆 柠檬酸盐 EDTA 肝素 草酸钾 ACD CPDA 标本保存 样本在收集后7天内检测，可保存在 2-8°C 条件下; 否则，标本需要分包装冷冻保存 (–20°C 或更低)。如果标本冷冻保存，使用前需要解冻并混匀。 标本的特定要求 含有颗粒物质、浑浊、脂血或红细胞残片的样本使用前需要过滤或离心。 严重溶血或脂血样本以及含有。颗粒物质或明显微生物污染的样本不能用于检测。 检测前检查并去除泡沫。 方法学 HIV 特异性抗体的定性测定采用抗原夹心化学发光免疫检测(CLIA)技术。 HIV p24抗原的定性测定采用P24抗原的单克隆抗体夹心化学发光免疫检测(CLIA)技术。 试剂 LIAISON? HIV抗体检测试剂盒 1.1 磁微粒：(2.5mL) 包被有HIV-1 gp41（M群和O群）以及HIV-2 gp35重组抗原（两者都从大肠杆菌中获得）的磁性微粒，BSA，PBS缓冲液，﹤0.1%的叠氮化钠 1.2 校准品：(1.8 mL ) 含有低浓度HIV抗体的人血清/血浆，BSA，PBS缓冲液，EDTA，0.2％的ProClin?300，惰性黄色染料。校准品的值可溯源到厂家的室内参考品。 1.3 样本稀释液：(11 mL) 绵羊血清，BSA，PBS缓冲液，EDTA，0.2％的ProClin?300，防腐剂。 1.4 结合物稀释液：(2*21 mL ) 牛血清，BSA，TRIS缓冲液，0.2％的ProClin?300，防腐剂。 1.5 结合物：(4.4 mL ) HIV-1 gp41（M群和O群）以及HIV-2 gp35重组抗原（两者都从大肠杆菌获得），与异鲁米诺衍生物结合，BSA，PBS缓冲液，0.2％