氯化钙法（CalciumChloride）大肠杆菌感受态细胞制备.PDFVIP

氯化钙法（Calcium Chloride ）大肠杆菌感受态细胞的制备 本方法适用于批量制备大肠杆菌感受态细胞，所得感受态细胞可以获得5 x 6 7 10 到 2x 10 转化克隆/微克超螺旋质粒DNA 材料（MATERIALS ） 缓冲液和溶液（Buffers and Solutions ） （冰冷的）CaCl •2H O (1 M) 2 2 冰冷的MgCl -CaCl s 溶液(solution, ice cold) 2 2 培养基（Media ） 用于初始培养物培养的LB 肉汤（L-broth for initial growth of culture ） LB agar plates containing appropriate antibiotic 核酸（Nucleic Acids ） 质粒DNA （Plasmid DNA ） 或经过重组的质粒（recombinant plasmid ） 方法 1.从37°C 过夜(16-20 hours)培养平皿内挑取一个直径约为2 到3 毫米的单菌落。 把这样的单菌落接种于一只装有5 毫升LB 肉汤的30 毫升灭菌试管中，于37°C 下振荡培养过夜。2