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大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。 限制酶 基因的剪刀——限制性内切酶(简称限制酶) (二)基因操作的工具 限制酶 什么叫黏性末端? (二)基因操作的工具 被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。 基因的针线——DNA连接酶 (二)基因操作的工具 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来,是把梯子两边扶手的断口连接起来,这样一个重组的DNA分子才能形成。 A A T T G C C T T A A G 磷酸二酯键 外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)? (二)基因操作的工具 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去。能将外源基因送入细胞的工具就是运载体。 大肠杆菌的质粒: (二)基因操作的工具 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒,它是能自主复制的双链闭环DNA分子 (三)基因工程的基本过程: 四个步骤: 1、获取目的基因 2、目的基因与运载体重组 3、重组DNA分子导入受体细胞 4、筛选含目的基因的受体细胞 1、概念: 为了得到其表达产物而把它转入到 新的生物体中去的基因。 2、获得目的基因的方法: (2)、通过化学方法人工合成 (1)、从生物体细胞中获得 步骤:第一步:基因定位 第二步:切取 方法: 用与切取目的基因相同的限制酶将质粒切开,在DNA连接酶的作用下,使目的基因和质粒结合成环状重组DNA分子。 目的: 重组质粒导入受体活细胞,借助受体细胞的代谢功能,使目的基因所蕴藏的遗传信息得到表达。 (四)转基因技术的应用: 微生物基因工程:微生物繁殖迅速、结构简单、遗传操作较为容易 植物基因工程 动物基因工程:以受精卵作为受体细胞 转基因生物产品的安全性: 关键问题一:转基因生物本身是否会对生态环境造成不良的影响如:大量的转基因植物进入自然界后,会使现有生态系统结构发生改变,影响生物的多样性,最终影响人类的生存环境和生产活动。 关键问题二:转基因生物产品是否会对人类的健康造成损害如:担心转基因食品中可能含致敏物质,会影响人类的健康。 基因工程培育抗虫棉的简要过程: (一)基因工程的概念 苏云金杆菌 获取 抗虫基因 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 重组DNA 导入 运载体 表达 时间 主要场所 过程 条件 原料 模板 酶 能量 遵循规律 产物 特点 意义 解旋酶和聚合酶 边解旋边复制 一个DNA分子复制n代后 A、DNA分子总数? C、含母链DNA分子数占 全部DNA分子数的比例 B、含母链的DNA分子数? 2n 2 基因的位置:DNA上 染色体是基因的主要载体,每个染色体含有一个DNA分子,每个DNA分子含有多个基因,基因在染色体上呈线性排列。 在生物体细胞中,基因成对存在,成对基因位于成对染色体的相对位置。 基因是有遗传效应的DNA片段 化学组成:每个基因含有成百上千个脱氧核苷酸。 基因的脱氧核苷酸排列顺序代表遗传信息。 A T G C 四、基因指导蛋白质的合成 基因控制生物性状 指导 合成 蛋白质 体现者 基因指导蛋白质合成的过程,叫基因的表达。 1.DNA主要存在哪里? 2.蛋白质在哪里合成? DNA 主要在细胞核 蛋白质的合成 在细胞质进行 指导 通过RNA 2. DNA与RNA的比较: 种类 DNA RNA 主要存在场所 空间结构 基本单位 碱基 五碳糖 无机酸 细胞核 细胞质 规则的双螺旋结构 通常呈单链 脱氧核糖核苷酸 核糖核苷酸 脱氧核糖 核糖 磷酸 磷酸 A、G、C、T A、G、C、U 基因与性状的关系 RNA 的种类 信使 RNA(mRNA) 核糖体 RNA(rRNA) 转运 RNA(tRNA) 1.RNA按功能分: (一)遗传信息的转录 运载氨基酸 参与核糖体构成 指导蛋白质合成 (1)转录的定义: (2)转录的场所: (3)转录的模板: (4)转录的原料: (5)转录的条件: (6)转录时的碱基配对: ( 7)转录的结果: 在细胞核中以DNA的一条链为模板,按碱基互补配对原则原则,合成mRNA的过程 细胞核 DNA的一条链 四种核糖核苷酸(A、G、
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