药物分析11第十时一章 抗生素类药物分析.ppt

药物分析 第十一章 抗生素类药物的分析 供试品溶液：0.2mg/ml(流动相溶） 对照溶液:供试品溶液，加流动相稀释成6?g/ml 对照溶液进样20?l ，调节仪器灵敏度，使主成分峰高约为记录仪满量程的10% 取供试品溶液和对照品溶液各20?l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2.5倍 供试品溶液如显杂质峰，量取各杂质峰面积的和，不得大于对照溶液主峰的面积 Your company slogan 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物）的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称 β–内酰胺类 氨基糖苷类 四环素类 大环内酯类 多烯大环类 多肽类 1. 抗生素（antibiotics） 2. 分 类 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 一、概 述 化学纯度较低 活性组分易发生变异 稳定性差 3. 来 源 4. 抗生素的特点 化学合成 半合成 生物合成（发酵） 生产工艺复杂 发酵过程不易控制，易受污染 原因 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 一、概 述 采用生物学法与物理化学法 鉴别：理化方法、微生物法 检查：水分、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等 含量/效价测定： 微生物法 ： 与临床疗效吻合，灵敏度高，但操作复杂费时； 理化方法： 准确度与专属性较高，且操作简便，但与临床疗效有偏差 5. 抗生素质量分析 一、概 述 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 1. 化学结构 包括青霉素类和头孢菌素类 青霉素类：6-APA为母核 头孢菌素类：7-ACA为母核 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 二、β–内酰胺类 酸性较强（pKa 2.5-2.8） 临床常用其碱金属盐 （水溶性好） 酸性(羧基) 有多个手性碳 旋光性 青霉素类：苯环取代基 头孢菌素类：母核有共轭结构 UV（共轭） 干燥条件较稳定，溶液不稳定 稳定性(内酰胺) 2、主要 理化性质 降解 失效 氧化剂、酸、碱 酶、金属离子、Δ 青霉素 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 二、β–内酰胺类 2、主要理化性质 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 二、β–内酰胺类 1）羟肟酸铁反应： β–内酰胺类 羟肟酸 显色 2）茚三酮反应 α-氨基 蓝紫色 3）双缩脲反应 β–内酰胺类 紫色 4）光谱法（UV、NMR） 5）色谱法（HPLC、TLC） NH2OH·HCl NaOH Fe3+ H+ 茚三酮 Δ 碱性酒石酸铜 呈色反应 3、鉴 别 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 二、β–内酰胺类 3、鉴 别-------------头孢利定的NMR鉴别法 (JP14) NMR鉴别法 单峰信号 取本品50mg溶于0.5ml重水中，测定NMR光谱时，应显示 多重峰信号 多重峰信号 δ= 3.8 附近 δ= 6.9～7.5 δ= 7.9～9.0 2 3 5 强度比 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 二、β–内酰胺类 3、鉴 别-------------头孢氨苄鉴别的TLC条件 CHP（2000） 5mg/ml 2μl 硅胶G 0.1mol/L枸橼酸液-0.2mol/LNa2HPO4-丙酮 (120:80:3) 0.1% 茚三酮溶液显色 USP（24） 25mg/ml 5μl 硅胶 醋酸乙酯-水-乙腈-冰HAc (48:18:14:14) 短波长UV光检出 BP（1999） 0.4%(W/V) 1μl 硅烷化硅胶HF254 15.4% NH4Ac(pH6.2)-丙酮(85:15) 254nm 检出 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 二、β–内酰胺类 4、特殊杂质检查--------------聚合物、有关物质、异构体等 色谱条件与系统适用性试验 测定法 头孢他啶中聚合物测定 头孢呋辛酯中 有关物质和异构体的检查 色谱条件与系统适用性试验 异构体和有关物质 举 例： 中 国 药 科 大 学 药 学 院 药 分 教 研 室 二、β–内酰胺类 头孢他啶中聚合物测定-----------色谱条件与系统适用性试验 葡聚糖凝胶G-10 理论板数应不低于900， 拖尾因