高速逆流色谱原理及应用.pptVIP

一、高速逆流色谱原理 DCCC（液滴逆流色谱） K ＝ Cs/Cm 二、高速逆流色谱优点 三、高速逆流色谱应用 芦荟提取物HSCCC分离图谱 丹参提取物的HSCCC分离图谱 沙棘提取物的HSCCC图谱 荔枝草提取物的HSCCC图谱 HSCCC在中药指纹图谱中的应用 中药指纹图系指中药经适当处理后，采用一定的分析手段（光谱和色谱）得到的能够标示该中药特性的共有峰的图谱 中药成分复杂，指纹图谱是中药质量控制的有效方法 2000年8月国家药品监督管理局规定中药注射剂必须建立药材和制剂的指纹图谱标准，美国FDA及欧共体药审委也要求采用指纹图谱技术 色谱法是指纹图谱的首选，传统的色谱指纹图谱方法存在缺陷（比如HPLC法前处理要求严格，会有死吸附或样品的变性，对有些样品不能准确反应其特征） 高速逆流色谱法是中药指纹图谱发展的一个新方向 　 从上面这些实例可以看出，HSCCC作为一种高效的液液分配色谱，拥有广阔的应用空间。 实例1 利用HSCCC分离标准蛋白质混合物 1 2 3 溶剂体系：PEG1000-磷酸盐体系-水＝14-16-70(%,w/w) 样品：1mg 细胞色素C、 20mg 溶菌酶、5mg 血红蛋白 1.Cytochrome C; 2.Lysozyme ; 3.Hemoglobin (反转出峰，上相为流动相) 色谱，2005,Vol.23 No.1 12～17 HSCCC在蛋白质分离纯化中的应用 溶剂体系：PEG1000-磷酸二氢钾-水＝15-17-68(%,w/w)样品：1mg 细胞色素C、8mg 肌红蛋白、20mg溶菌酶 1.Cytochrome C; 2.Myoglobin 3.Lysozyme 实例2 利用HSCCC分离标准蛋白质混合物 HSCCC在蛋白质分离纯化中的应用 地址：上海市张江高科技园区爱迪生路326号 邮编：201203 Tel: 021 Fax: 021 Cell phone:E-mail: tauto@ How to Contact Us: Xanthotoxin（花椒毒素） isopimpinellin（异茴芹素） bergapten（佛手苷内酯） imperatorin（欧前胡素） osthole（蛇床子素 ） Evodiamine（吴茱萸碱） rutaecarpine（吴茱萸次碱） evocarpine（吴茱萸新碱） 外标法检测 红霉素A含量88％以上，B和C含量不得大于主峰面积5％ 即合格 * 高速逆流色谱技术及应用领域 　　　　　　上海同田生物技术有限公司 报告内容 1 高速逆流色谱原理 2 高速逆流色谱优点 3 高速逆流色谱应用 缺点：流动相流速低，每小时只有十几毫升；分离过程 长，一般需要几十小时才能完成一次几个组分的分离． Disadvantage Low flow rate Long separation time 液－液分配色谱 利用一种特殊的流体动力学现象使互不混溶的两相溶剂(固定相和流动相)在螺旋管中高效地接触、混合、分配和传递 其中固定相以一种相对均匀的方式分布在一根聚四氟乙烯管绕成的螺旋管中 流动相以一定的速度通过固定相，并按照被分离物质分配系数的不同依次洗脱而获得分离 特殊的流体动力学？ 固定相的保留 利用螺旋管的方向性和同步行星式运动产生的二维 离心力场形成的单向性流体动力学平衡（HDES） 从而实现流动相高速移动时固定相的保留 混合区：在靠近离心轴心大约有四分之一的区域，两相的激烈混合 静置区：两相溶剂分成两层，重相在外部，轻相在内部 以1000转/分的速率进行旋转，在二维力场的作用下分离管柱内混合和传递的频率可达到17次/S，从而实现高效的分离 Cs Cm HSCCC的工作流程 不用固态载体的高效液-液分配色谱技术 不存在样品的不可逆吸附，理论回收率100% 样品负载能力强，制备量大，重现性好 操作成本低，无制备柱消耗，后续投入较低 可采用广泛的溶剂体系和多样性的操作条件 操作简单，无需太多样品前处理 高速逆流色谱技术的应用领域 1 高速逆流色谱在中药现代化中的应用 2 高速逆流色谱在抗生素分离纯化中的应用 3 高速逆流色谱在异构体分离纯化中的应用 4 高速逆流色谱在食品行业中的应用 5 高速逆流色谱在化学合成中的应用 6 高速逆流色谱在生物领域中的应用 7 高速逆流色谱在发酵产物分离纯化中的应用 高速逆流色谱 在中药现代化中的应用 成药质量控制 指纹图谱 指导原药材种植/ GA