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江苏省睢宁高级中学 高二生物学习单
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酵母细胞的固定化
学习目标:1.说出固定化酶和固定化细胞的作用、原理和方法。
2.尝试制备固定化酵母细胞,并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。
学习重点: 制备固定化酵母细胞。
学习难点: 制备固定化酵母细胞。
学讲过程
一、固定化酶的应用实例(P49)
1、高果糖浆是指 。
2、能将葡萄糖转化为果糖的酶是 。使用固定化酶技术,将这
种酶固定在一种 上,再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱子底
端装上分布着许多小孔的 。酶颗粒无法通过筛板的 ,而
却可以自由出入。生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,使
葡萄糖溶液流过反应柱,与 接触,转化成果糖,从反应柱
的下端流出。反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的
产量和质量。
二、固定化细胞技术(P50)
1、固定化酶和固定化细胞是利用 或 方法将酶或细胞固定在一
定空间内的技术,包括 、 和 法。
2、一般来说,酶更适合采用 和 法固定,而细胞多采用
法固定化。这是因为细胞个大,而酶分子很小;个大的难以被
或 ,而个小的酶容易从 中漏出。
3、包埋法法固定化细胞即将微生物细胞 包埋在不溶于水的 中。
常用的载体有 、 、 、 和 等。
【质疑拓展】
〖思考1〗对固定酶的作用影响较小的固定方法是什么?
〖思考2〗将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的发酵过程变为连续的酶反应,应当固
定( );若将蛋白质变成氨基酸,应当固定( )。
【合作探究】
三、实验操作
(一)制备固定化酵母细胞(P50)
制备固定化酵母细胞需要的材料是 、 和
1.酵母菌的活化
活化就是处于 状态的微生物重新恢复正常的生活状态。
2.配制物质的量尝试为0.05mol/L的Cacl2溶液
3.配制海藻酸钠溶液
加热溶化海藻酸钠时要注意:
4.海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合
5.固定化酵母细胞
以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的 溶液中,
并浸泡 (时间)。
(二)用固定化酵母细胞(凝胶珠)发酵
1.将固定好的酵母细胞用 冲洗2-3次。
2.发酵时的温度就为 ,时间 。
【质疑拓展】
〖思考3〗加热溶化海藻酸钠时微火加热并不断搅拌的目的是什么?
〖思考4〗为什么要海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞?
〖思考5〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封?
〖思考6〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的?
〖思考7〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中,需要无菌操作吗?
四、结果分析与评价
1. 观察凝胶珠的颜色和形状
如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵
母细胞数目较少;
如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失
败,需要再作尝试。
2. 观察发酵的葡萄糖溶液
利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多 ,同时会
闻到 。
巩固练习
1、使用固定化细胞的优点是 ( )
A. 能催化大分子物质的水解 B.可催化一系列化学反应
C. 与反应物易接近 D.有利于酶在细胞外发挥作用
2、酶的固定方法不包括
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