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第34 卷 第11 期 中 南 林 业 科 技 大 学 学 报 Vol. 34 No. 11
2014 年 11 月 Journal of Central South University of Forestry Technology Nov. 2014
尾叶桉GLU4肉桂酰-辅酶A还原酶
基因克隆及原核表达
1，2 1 1
陈博雯 ，盖 颖 ，蒋湘宁
（1. 北京林业大学生物科学与技术学院，北京100083；
2. 广西林科院 广西优良用材林资源培育重点实验室，广西南宁530002 ）
CCR CCR
摘 要：肉桂酰- 辅酶A 还原酶(Cinnamoyl Co-A Reductase， ) 是木质素合成中的关键酶，根据植物中
保守序列设计引物，以尾叶桉GLU4 嫩茎为材料克隆到其CCR 基因，命名为EuCCR 。该基因gDNA 长2 918
EuCCR CCR
bp ，cDNA 长1 045 bp ，CDS 区编码336 个氨基酸。 核酸序列与GenBank 已登录的桉属植物 基因同
源性达到96% 以上，与伞房属、杯果木属植物CCR 的同源性达85% 以上，其编码的氨基酸序列经比对发现具
有完整FR_SDR_e 结构域及NADP 结合位点和底物结合位点，与可可树等植物中CCR 基因编码序列同源性也在
84% 以上，确定为CCR 基因。对EuCCR 蛋白序列理化性质及结构进行生物信息学分析，利用MEGA 软件对基
因序列进行系统进化树分析。采用pQE30/M 15 系统对EuCCR 进行原核表达，重组质粒成功表达分子量约36 kD
的目的蛋白。本研究从尾叶桉GLU4 中克隆得到EuCCR 基因并原核表达，为该基因的酶学分析以及利用该基因
转化调控尾叶桉木质素合成奠定基础。
关键词：尾叶桉；肉桂酰- 辅酶A 还原酶；生物信息学分析；原核表达
中图分类号：S792.39 文献标志码：A 文章编号：1673-923X(2014) 11-0071-06
Cloning and prokaryotic expression of cinnamoyl Co-A reductase of
Eucalyptus urophylla clone GLU4
1,2 1 1
CHEN Bo-wen , GAI Ying , JIANG Xiang-ning
(1. School of Biology Science and Biotechnology, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China; 2. Guangxi Key Lab. of Superior
Timber Trees Resource Cultivation, Guangxi F
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